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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 胶回收时跑不出条带
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mcj2008008
祝福~~！
41楼2014-09-09 14:29:20
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英雄诺坎普
42楼2014-09-09 14:51:52
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bwangel

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
childchou: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 16:48:45
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:45:55
我想很多人和我一样可能会错意了，楼主压根没做胶回收，而是先把PCR引物跑4微升，带正常，然后跑了40微升，就没带了是不，

如果这样的话，首先染料和电解液和PCR都没问题，因为这些东西你压根就没换，唯一的问题很可能是胶的问题，胶没做好基本是

有一楼说的对，别纠结了，反正都跑掉了，再重新PCR吧，这次把小孔和大孔的胶做一起，这样胶就不会出问题了，一般你小的能跑出来，大的也一定能跑出来
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43楼2014-09-09 15:55:37
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
40楼: Originally posted by qapollo at 2014-09-09 13:12:28
你再扩一次就好了，不用纠结于这种事情。也许是你的操作出现了错误，也许是样品时间长了发生了降解。按照之前的步骤再扩一次就能知道到底是不是有问题了。

pcr出来后直接跑的啊，没有放很久了，最多1小时，而且是放4°这个问题出现3次了，
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boomshakalaka
44楼2014-09-09 16:44:11
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
38楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-09-09 11:42:28
这跟染料没多大关系吧，我也出现这个问题，回收后目的条带不见了，经个人分析，可能是酶和引物的缘故比较大，我是换了酶，重设了引物后就可以了

啊？用的就是最常用的taq酶，实验室克隆都是用这个，感觉这个的问题就是，加少量样跑电泳能出来，加样变多后电泳反而看不到了，纠结
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boomshakalaka
45楼2014-09-09 16:46:20
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
43楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-09 15:55:37
我想很多人和我一样可能会错意了，楼主压根没做胶回收，而是先把PCR引物跑4微升，带正常，然后跑了40微升，就没带了是不，

如果这样的话，首先染料和电解液和PCR都没问题，因为这些东西你压根就没换，唯一的问题 ...

就你最懂我了，对的就是这个意思，好的呢，我这就试试去。
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boomshakalaka
46楼2014-09-09 16:48:29
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wanqingming

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
原来有，回收的时候怎么会没有。是不是中间出了问题，我觉得可能是洗脱的时候，出了问题把。我们也用goldview，我觉得挺好的。
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好好生活。拿得起，放得下，要坚强。。。
47楼2014-09-09 17:07:23
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childchou

银虫 (小有名气)
引用回帖:
47楼: Originally posted by wanqingming at 2014-09-09 17:07:23
原来有，回收的时候怎么会没有。是不是中间出了问题，我觉得可能是洗脱的时候，出了问题把。我们也用goldview，我觉得挺好的。

我错了，是我没有说清楚，请看43楼.....
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boomshakalaka
48楼2014-09-09 18:04:20
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)
路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利！
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49楼2014-09-09 18:16:08
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
更换胶回收试剂盒，我以前也碰到过

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我还年轻，我要上路！
50楼2014-09-09 18:30:46
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