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mcj2008008

祝福~~！

41楼2014-09-09 14:29:20

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英雄诺坎普

42楼2014-09-09 14:51:52

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bwangel

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
childchou: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 16:48:45
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:45:55

我想很多人和我一样可能会错意了，楼主压根没做胶回收，而是先把PCR引物跑4微升，带正常，然后跑了40微升，就没带了是不，

如果这样的话，首先染料和电解液和PCR都没问题，因为这些东西你压根就没换，唯一的问题很可能是胶的问题，胶没做好基本是

有一楼说的对，别纠结了，反正都跑掉了，再重新PCR吧，这次把小孔和大孔的胶做一起，这样胶就不会出问题了，一般你小的能跑出来，大的也一定能跑出来

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43楼2014-09-09 15:55:37

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childchou

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引用回帖:

40楼: Originally posted by qapollo at 2014-09-09 13:12:28
你再扩一次就好了，不用纠结于这种事情。也许是你的操作出现了错误，也许是样品时间长了发生了降解。按照之前的步骤再扩一次就能知道到底是不是有问题了。

pcr出来后直接跑的啊，没有放很久了，最多1小时，而且是放4°这个问题出现3次了，

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boomshakalaka

44楼2014-09-09 16:44:11

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childchou

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38楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-09-09 11:42:28
这跟染料没多大关系吧，我也出现这个问题，回收后目的条带不见了，经个人分析，可能是酶和引物的缘故比较大，我是换了酶，重设了引物后就可以了

啊？用的就是最常用的taq酶，实验室克隆都是用这个，感觉这个的问题就是，加少量样跑电泳能出来，加样变多后电泳反而看不到了，纠结

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boomshakalaka

45楼2014-09-09 16:46:20

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childchou

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43楼: Originally posted by bwangel at 2014-09-09 15:55:37
我想很多人和我一样可能会错意了，楼主压根没做胶回收，而是先把PCR引物跑4微升，带正常，然后跑了40微升，就没带了是不，

如果这样的话，首先染料和电解液和PCR都没问题，因为这些东西你压根就没换，唯一的问题 ...

就你最懂我了