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childchou银虫 (小有名气)
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胶回收时跑不出条带 已有18人参与
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小弟做基因克隆，PCR后跑电泳观察，上样量4ul，跑出的条带很亮，而且片段大小正确1000bp，然后进行胶回收，把4管PCR产物混一起，每个胶孔上样40ul，跑电泳后发现目的片段处没有条带，反而在100-200bp大小处出现很亮的条带，应该是引物二聚体，想请教下各位大神，这是为什么呀！用的染料是goldview，胶染法。急急急急急！！！！！ |
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【答案】应助回帖
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childchou: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 16:48:45
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:45:55
childchou: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-09 16:48:45
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:45:55
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我想很多人和我一样可能会错意了，楼主压根没做胶回收，而是先把PCR引物跑4微升，带正常，然后跑了40微升，就没带了是不， 如果这样的话，首先染料和电解液和PCR都没问题，因为这些东西你压根就没换，唯一的问题很可能是胶的问题，胶没做好基本是 有一楼说的对，别纠结了，反正都跑掉了，再重新PCR吧，这次把小孔和大孔的胶做一起，这样胶就不会出问题了，一般你小的能跑出来，大的也一定能跑出来 |
43楼2014-09-09 15:55:37
tangjiguoice
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得金币了，说声谢谢！2楼2014-09-07 21:09:20
childchou
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3楼2014-09-07 21:18:27
人偶骑士
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5楼2014-09-07 21:27:07
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