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用鉴定真菌的通用引物its1、its4，为何扩出目的条带呢 已有3人参与
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刚筛选出4种真菌，用通用引物做pcr，从电泳图上看，请问我出了哪些问题呢？ 1号出现弥散条带，2号条带范围从400bp到550bp间，3、4号出现了不止一个条带，而且最大的达到5000bp，我弄错了什么吗？没分离完全？还是PCR出了问题？ 反应温度如下： 94℃ 3min 94℃ 30s 55℃ 45s 72℃ 1min 35cycle 72℃ 3min 通用引物 ITSl(5’一TCC GTA GGT GAA CCT GCGG-3’) ITS4(5’一TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC一3’) 四种DNA浓度分别为15ng/ul、31ng/ul、 168ng/ul、 27ng/ul、 260/280分别为1.77、1.63、1.82、1.74。 谢谢了  2014-8-26 _副本.jpg |
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