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yuren2009

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by zans2009 at 2014-08-27 19:32:01
因为只知道是某种真菌,但不知道是哪种真菌,如果更换引物的话,前辈建议用哪种引物呢?...

建议你重新提一下DNA和PCR,还是如此的话,可以考虑ITS其它引物。
学习使你立于不败之地
11楼2014-08-27 23:26:32
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hihe99

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by zans2009 at 2014-08-27 20:39:31
因为是第一次做这方面的工作,有些还不是很明白。
电泳出现无单一的条带,不知道是否是因为没有纯化好。
在真菌鉴定中,用ITS做PCR出现5kb的非特异条带的情况普遍吗?貌似文献中没有提及非特异条带的问题。...

我做过个1600的,是正确的,也有报道,你的5000也可能是正确的,仅供参考
12楼2014-08-28 13:47:00
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zans2009

铜虫 (初入文坛)

稀释了20倍,3、4号问题依旧啊
13楼2014-08-28 21:19:56
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lesley1139

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zans2009 at 2014-08-27 11:46:22
我筛出4种真菌,做PCR是打算胶回收后测序做鉴定的,用its通用引物P出真菌的its2序列应该是500bp左右吧。现在3、4号出现5kb的条带,而且500bp处的条带不如1、2号那么明显,心里没谱了...

求问楼主,扩增产物如何推算的
14楼2016-10-19 16:03:47
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宋娜songna

新虫 (初入文坛)

你用95度10min试一试
15楼2018-08-15 09:47:43
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lucifer晗

铜虫 (初入文坛)

楼主,请问您是如何提的基因组DNA呢,我是做酵母的,但用试剂盒提出的基因组DNA只有几ng。是不是菌种不同所以提出来的浓度差很多?
16楼2020-01-07 21:47:25
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