应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 基因组DNA 酶切后条带不清晰，什么原因啊？
51/1返回列表
查看: 2835  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xm_liu

铁虫 (初入文坛)

[求助] 基因组DNA 酶切后条带不清晰，什么原因啊？ 已有6人参与

各位虫友，我提取的腺病毒基因组DNA，用Fsp I 酶切后条带很不清晰，不知道是什么原因，酶切体系是50ul，其中酶2ul，泳道1是marker，泳道2 是其他样品，泳道3 的DNA 是10ug，泳道4  20ug，泳道5 40ug，37℃，酶切过夜，约17h，谢谢大家了！

基因组DNA 酶切后条带不清晰，什么原因啊？
IMG_20140822_122802.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-22 14:41:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xm_liu

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenguestc at 2014-08-22 17:28:40
1，从你的图中可以看出，样品DNA序列中可能有多个酶切位点，因此切出几条弱带及弥散。
2，其次，这个酶酶切的时间需要根据要求设定，普通酶切一般45分钟到2个小时足够了，你的样品过夜酶切，不晓得温度是否会对你的 ...

1、理论上应该切出13条带，也不应该是这么弱的或者弥散的呀；
2、切的是基因组DNA，不是质粒载体，不知道会不会切不完全，依你看这个结果有可能是DNA降解造成的吗？
3、根据酶的说明书，30ul体系用1000ngDNA，实际电泳效果不好，条带非常弱，不清晰，所以做了梯度
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-23 15:51:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xm_liu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-22 20:56:29
我做过用双酶切切基因组的  是一片弥散的条带
但没做过用单酶切的 而且病毒没研究过
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-22 15:17:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xm_liu(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-22 20:56:41
1，从你的图中可以看出，样品DNA序列中可能有多个酶切位点，因此切出几条弱带及弥散。
2，其次，这个酶酶切的时间需要根据要求设定，普通酶切一般45分钟到2个小时足够了，你的样品过夜酶切，不晓得温度是否会对你的样品造成降解。
3，酶切样品为什么用不同浓度？根据酶的说明书来配比酶切体系和样品DNA即可哈。
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-22 17:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xm_liu: 金币+1, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2014-08-26 16:24:12
你的上样量不到10 μg吧。有些酶不能酶切甲基化的酶切位点。
赞一下 回复此楼
5楼2014-08-24 10:18:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿天大材料与化工（085600）总分338 +4 蔡大美女 2026-03-13 4/200 2026-03-18 22:47 by walc
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +4 1孙悟空 2026-03-17 4/200 2026-03-18 17:59 by fivewind
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 9/450 2026-03-18 15:31 by vgtyfty
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 085600材料与化工求调剂 +5 绪幸与子 2026-03-17 5/250 2026-03-17 16:40 by laoshidan
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 招收0805（材料）调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭