应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » NotI酶切基因组DNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 1304  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

[求助] NotI酶切基因组DNA

有哪位大侠知道为什么用NotI或AscI切基因组DNA总是切不开，不能产生smear，加大酶的用量和改变体系仍是切不开？有谁用过这两种酶切genomic DNA的啊？急求帮助，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-07-16 17:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-17 12:45:37
首先，确保NotI反应体系没有错，其次，DNA要求比较干净。因为NotI活力不是很高，另外NotI是识别8个碱基GCGGCCGC的
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-17 10:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 10:56:07
首先，确保NotI反应体系没有错，其次，DNA要求比较干净。因为NotI活力不是很高，另外NotI是识别8个碱基GCGGCCGC的

那请问你们都是用什么方法提取的基因组DNA啊，我是用酚氯仿方法提取的，这样不行吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-17 12:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-07-17 12:37:24
那请问你们都是用什么方法提取的基因组DNA啊，我是用酚氯仿方法提取的，这样不行吗？...

我也是用这个方法提取，建议抽提两次后，再用氯仿抽提一次。还有一点是可以做一个加入DNA量的梯度试试。
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-17 12:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 12:40:51
我也是用这个方法提取，建议抽提两次后，再用氯仿抽提一次。还有一点是可以做一个加入DNA量的梯度试试。...

DNA量做了好多个，体系也改变了几次，仍是切不开，请问你用NotI切开了？总是切不开，急求帮助啊
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-17 13:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-07-17 13:31:41
DNA量做了好多个，体系也改变了几次，仍是切不开，请问你用NotI切开了？总是切不开，急求帮助啊...

如果是这样，那为什么不换一下酶呢？每个基因组都有区别
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-17 13:43:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuzhu598 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0855求调剂材料 +11 红桃灼灼 2026-04-04 11/550 2026-04-05 22:13 by 醉翁wl
[考研] 生物与医药273求调剂 +5 荔题南墙 2026-04-05 5/250 2026-04-05 22:04 by imissbao
[考研] 考研生物与医药调剂 +8 铁憨憨123425 2026-03-31 8/400 2026-04-05 20:28 by lys0704
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +7 瓶子PZ 2026-03-31 7/350 2026-04-05 17:49 by liucky
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 081700学硕，323分，一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考博] 申博 +7 IQwQl 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:32 by mumin1990
[考研] 359求调剂 +7 hhhhaaaa$ 2026-04-04 7/350 2026-04-04 18:49 by imissbao
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +11 lyz0427 2026-04-03 11/550 2026-04-04 15:31 by dongzh2009
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-30 9/450 2026-04-04 11:04 by 猪会飞
[考研] 283分材料与化工求调剂 +29 罗KAKA 2026-04-02 29/1450 2026-04-03 23:56 by userper
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 319求调剂 +18 太容易1018 2026-04-01 18/900 2026-04-03 11:18 by linyelide
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[考研] 专硕 351 086100 也是考的材科基 本科也是材料 +8 202451007219 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:50 by 蓝云思雨
[考研] 298求调剂 +4 什么是胖头鱼 2026-03-30 6/300 2026-04-01 22:06 by 客尔美德
[考研] 江苏科技大学招材料研究生 +4 Su032713. 2026-04-01 5/250 2026-04-01 22:03 by cccchenso
[考研] 288资源与环境专硕求调剂，不限专业，有学上就行 +25 lllllos 2026-03-30 26/1300 2026-04-01 09:52 by 一只好果子?
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭