应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » NotI酶切基因组DNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 1309  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuzhu598

铁虫 (小有名气)

[求助] NotI酶切基因组DNA

有哪位大侠知道为什么用NotI或AscI切基因组DNA总是切不开，不能产生smear，加大酶的用量和改变体系仍是切不开？有谁用过这两种酶切genomic DNA的啊？急求帮助，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-07-16 17:58:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-17 12:45:37
首先，确保NotI反应体系没有错，其次，DNA要求比较干净。因为NotI活力不是很高，另外NotI是识别8个碱基GCGGCCGC的
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-17 10:56:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 10:56:07
首先，确保NotI反应体系没有错，其次，DNA要求比较干净。因为NotI活力不是很高，另外NotI是识别8个碱基GCGGCCGC的

那请问你们都是用什么方法提取的基因组DNA啊，我是用酚氯仿方法提取的，这样不行吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-17 12:37:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-07-17 12:37:24
那请问你们都是用什么方法提取的基因组DNA啊，我是用酚氯仿方法提取的，这样不行吗？...

我也是用这个方法提取，建议抽提两次后，再用氯仿抽提一次。还有一点是可以做一个加入DNA量的梯度试试。
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-17 12:40:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuzhu598

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 12:40:51
我也是用这个方法提取，建议抽提两次后，再用氯仿抽提一次。还有一点是可以做一个加入DNA量的梯度试试。...

DNA量做了好多个，体系也改变了几次，仍是切不开，请问你用NotI切开了？总是切不开，急求帮助啊
赞一下 回复此楼
5楼2013-07-17 13:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by xuzhu598 at 2013-07-17 13:31:41
DNA量做了好多个，体系也改变了几次，仍是切不开，请问你用NotI切开了？总是切不开，急求帮助啊...

如果是这样，那为什么不换一下酶呢？每个基因组都有区别
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-17 13:43:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuzhu598 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +19 lllllos 2026-04-04 22/1100 2026-04-06 22:58 by chenzhimin
[考研] 304求调剂（085602，过四级，一志愿985） +16 化工人999 2026-04-04 16/800 2026-04-06 22:55 by chenzhimin
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +16 haaaabcd 2026-04-05 17/850 2026-04-06 19:25 by 尚水阁主
[考研] 材料与化工363求推荐 +11 zh096 2026-04-04 11/550 2026-04-06 19:14 by guanxin1001
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 081700，311，求调剂 +16 冬十三 2026-04-04 17/850 2026-04-06 14:56 by 尚水阁主
[考研] 372分，材料与化工，一志愿湖南大学，求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-01 3/150 2026-04-06 09:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿西安交大材料学硕（英一数二）347，求调剂到高分子/材料相关专业 +8 zju51 2026-03-31 10/500 2026-04-06 09:03 by 醉翁wl
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 求调剂 +10 Hll胡 2026-04-04 10/500 2026-04-05 20:09 by nepu_uu
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 18:51 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿青科085500，初试295分，公共课213分 +3 遇到的人愿望都� 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:45 by 蓝云思雨
[有机交流] 甲醇/二氯 1:15过柱子 5+3 a哎y呦w喂 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:42 by 88817753
[考研] 413求调剂 +4 柯某某 2026-03-31 4/200 2026-04-04 22:18 by 学员6BFVa3
[考研] 292分，材料与化工，申请调剂 +22 程晴之 2026-04-01 26/1300 2026-04-04 22:03 by hemengdong
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 建环，能源，土木老师路过看一看！！！ +5 嘿嘿uu 2026-04-01 5/250 2026-04-03 11:47 by znian
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:19 by 蓝云思雨
[考研] 346求调剂 +5 郑诚乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 16:38 by SZW_UJN
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭