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PCR SOS!!
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jkamm
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专业: 农业昆虫学
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PCR SOS!!
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我做某虫了DNA基因组提取,重复3次了提基因组,PCR后电泳检测竞无条带! 自己找不到原因了,请高人指点下,本人用的虫子很小,1-2mm大小,单头提基因组的,为何同一虫子其它地方都可提成功,就某一地方种群竞是一个也提不出来,发图片请教?是模板问题吗?
JM1-JM10,HQ1-HQ8 2014-08-20 15 小时 08 分钟.jpg
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2014-08-20 17:06:14
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我欲乘风归去
木虫
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专业: 植物生理与生化
你模板也用电泳检查下啊。
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。
2楼
2014-08-20 20:13:43
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bio_sci
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专业: 病原细菌与放线菌生物学
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jkamm(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流
2014-08-21 18:09:31
建议别提dna了,模板量太少,不够起始量的,建议直接pcr
[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼
2014-08-20 20:34:39
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青青草allan
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专业: 农业昆虫学
【答案】应助回帖
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jkamm(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流
2014-08-21 18:09:42
我也做过一种很小的虫子的基因组提取,刚开始用的是去掉腹部的虫体,也检测不出来基因组,但是直接进行PCR是不影响的,不用检测基因组。后来我在显微镜下把一对后足取下来,只用一对细小的后足提基因组,不检测,直接进行PCR,也很容易就扩出来了。DNA是很好提的,你可以试试不检测,直接PCR。
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爱出者爱返,福往者福来
4楼
2014-08-20 22:43:59
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盛夏海棠
木虫
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虫号: 1710608
注册: 2012-03-22
性别:
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专业: 农业昆虫学
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你上面的那个图在750bp有模糊的条带,PCR体系和条件优化一下应该可以得到很亮的条带;下面的电泳图下面不是有条带吗?这个是检测DNA的电泳图吗?
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天道酬勤
5楼
2014-08-21 18:25:32
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