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jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] PCR SOS！！ 已有3人参与

我做某虫了DNA基因组提取，重复3次了提基因组，PCR后电泳检测竞无条带！ 自己找不到原因了，请高人指点下，本人用的虫子很小，1-2mm大小，单头提基因组的，为何同一虫子其它地方都可提成功，就某一地方种群竞是一个也提不出来，发图片请教？是模板问题吗？

PCR  SOS！！
JM1-JM10,HQ1-HQ8 2014-08-20 15 小时 08 分钟.jpg
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1楼 2014-08-20 17:06:14
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
你模板也用电泳检查下啊。
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。
2楼2014-08-20 20:13:43
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jkamm(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:09:31
建议别提dna了，模板量太少,不够起始量的，建议直接pcr

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-08-20 20:34:39
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青青草allan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jkamm(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:09:42
我也做过一种很小的虫子的基因组提取，刚开始用的是去掉腹部的虫体，也检测不出来基因组，但是直接进行PCR是不影响的，不用检测基因组。后来我在显微镜下把一对后足取下来，只用一对细小的后足提基因组，不检测，直接进行PCR，也很容易就扩出来了。DNA是很好提的，你可以试试不检测，直接PCR。
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爱出者爱返，福往者福来
4楼2014-08-20 22:43:59
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盛夏海棠

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你上面的那个图在750bp有模糊的条带，PCR体系和条件优化一下应该可以得到很亮的条带；下面的电泳图下面不是有条带吗？这个是检测DNA的电泳图吗？
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天道酬勤
5楼2014-08-21 18:25:32
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