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jkamm

金虫 (正式写手)

[求助] PCR SOS!!已有3人参与

我做某虫了DNA基因组提取,重复3次了提基因组,PCR后电泳检测竞无条带! 自己找不到原因了,请高人指点下,本人用的虫子很小,1-2mm大小,单头提基因组的,为何同一虫子其它地方都可提成功,就某一地方种群竞是一个也提不出来,发图片请教?是模板问题吗?

PCR  SOS!!
JM1-JM10,HQ1-HQ8 2014-08-20 15 小时 08 分钟.jpg
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盛夏海棠

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你上面的那个图在750bp有模糊的条带,PCR体系和条件优化一下应该可以得到很亮的条带;下面的电泳图下面不是有条带吗?这个是检测DNA的电泳图吗?
天道酬勤
5楼2014-08-21 18:25:32
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)

你模板也用电泳检查下啊。
2楼2014-08-20 20:13:43
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jkamm(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:09:31
建议别提dna了,模板量太少,不够起始量的,建议直接pcr

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-08-20 20:34:39
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青青草allan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jkamm(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-21 18:09:42
我也做过一种很小的虫子的基因组提取,刚开始用的是去掉腹部的虫体,也检测不出来基因组,但是直接进行PCR是不影响的,不用检测基因组。后来我在显微镜下把一对后足取下来,只用一对细小的后足提基因组,不检测,直接进行PCR,也很容易就扩出来了。DNA是很好提的,你可以试试不检测,直接PCR。
爱出者爱返,福往者福来
4楼2014-08-20 22:43:59
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