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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 试剂盒提取总RNA后电泳图
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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)

[求助] 试剂盒提取总RNA后电泳图 已有13人参与

最近用qiagen试剂盒提取了一批总RNA准备做芯片，让人郁闷的提取了几次RNA总是这样见下图，左侧是Marker ,前3个是细胞总RNA，浓度分别是140多，600多， 150多；后4个是组织RNA，浓度在300-600之间（浓度单位是ng/ul），OD值在2.0左右;胶的浓度是1%TAE，上样量1ul 6*loading buffer,5ulRNA，Marker5ul未稀释。电压100，150v都用过，是降解了吗？还是其他原因？

试剂盒提取总RNA后电泳图
98532540.jpg
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1楼 2014-07-21 13:03:30
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
降解了

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-07-21 13:09:07
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader
却是是降解了。
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3楼2014-07-21 13:13:22
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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-07-21 13:09:07
降解了

刚提的马上做的电泳啊 ，做实验也有很长时间了，操作应该没什么问题，难道是试剂？
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4楼2014-07-21 13:22:31
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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-07-21 13:13:22
却是是降解了。

枪头都是高温灭菌的，操作应该没什么问题的，难道是试剂有问题?
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5楼2014-07-21 13:24:45
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:25
引用回帖:
4楼: Originally posted by cmugaoxiaohu at 2014-07-21 13:22:31
刚提的马上做的电泳啊 ，做实验也有很长时间了，操作应该没什么问题，难道是试剂？...

所有物品都是提RNA级别的吗？操作时间长了吧，天气热你的冰盒凉吗

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6楼2014-07-21 13:32:03
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yichunh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:29
试剂是有换新的还是都是之前用着好用的？跑了多长时间的电泳？电泳时间要短一些啊~
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7楼2014-07-21 15:03:39
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Romaner007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:32
亲，那确实是降解了！你确定是用灭菌的？在高压灭菌锅灭的是不行的！买提取RNA专用的！还有整个提取过程都需要在冰上操作！
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人的一切都应该是美丽的！
8楼2014-07-21 17:52:02
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biot

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:36
试剂的问题最大，操作只要保证物品是灭菌的就行，也不需要低温

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扬帆起航！
9楼2014-07-21 19:58:05
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娜shn

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:40
引用回帖:
4楼: Originally posted by cmugaoxiaohu at 2014-07-21 13:22:31
刚提的马上做的电泳啊 ，做实验也有很长时间了，操作应该没什么问题，难道是试剂？...

现在室内温度有些高，如果操作是在冰盒上进行的，而且操作没问题，跑胶时间不是太长的话，应该就是试剂盒的问题或者是降解了了。
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10楼2014-07-21 20:33:25
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