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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 贴壁细胞RNA提取的相关问题
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yixinyuan

木虫 (正式写手)

[求助] 贴壁细胞RNA提取的相关问题

最近提取贴壁细胞RNA，直接用Trizol 裂解预处理干净的贴壁细胞，为何不能裂解透彻？并且取出的RNA质量还不理想，，是我的Trizol 不好还是实验其它环境有问题？可以保证的是咱耗材这方面没有RNA酶污染。
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1楼 2012-03-26 21:32:20
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yixinyuan: 金币+1, ★有帮助, 感谢 2012-03-27 22:26:38
有可能是你的TRIZOL不好或者你操作不够严格，TRIZOL对细胞壁的破坏还是挺强的，用枪一吹就可以掉了，要是不好吹你还可以用细胞刮。发生降解那很有可能是操作问题了，多注意细节，做好防护措施！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我就是我
2楼2012-03-27 00:34:22
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孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yixinyuan: 金币+1, ★有帮助, 感谢 2012-03-27 22:27:06
提RNA最关键的是氯仿沉淀核酸后要混匀，其次就是吸上清的时候能少吸就少吸，尽量避免DNA污染
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3楼2012-03-27 14:23:33
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yixinyuan: 金币+1, ★有帮助, 感谢 2012-03-27 22:27:28
我用Trizol裂解的时候效果挺好的 没准是你环境周围不是特别好，不过也有可能是Trizol有问题，你的异丙醇氯仿什么的没有问题吧
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4楼2012-03-27 15:42:54
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