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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)

[求助] 试剂盒提取总RNA后电泳图 已有13人参与

最近用qiagen试剂盒提取了一批总RNA准备做芯片,让人郁闷的提取了几次RNA总是这样见下图,左侧是Marker ,前3个是细胞总RNA,浓度分别是140多,600多, 150多;后4个是组织RNA,浓度在300-600之间(浓度单位是ng/ul),OD值在2.0左右;胶的浓度是1%TAE,上样量1ul 6*loading buffer,5ulRNA,Marker5ul未稀释。电压100,150v都用过,是降解了吗?还是其他原因?

试剂盒提取总RNA后电泳图
98532540.jpg
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

降解了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-21 13:09:07
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader


却是是降解了。
3楼2014-07-21 13:13:22
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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-07-21 13:09:07
降解了

刚提的马上做的电泳啊 ,做实验也有很长时间了,操作应该没什么问题,难道是试剂?
4楼2014-07-21 13:22:31
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cmugaoxiaohu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-07-21 13:13:22
却是是降解了。

枪头都是高温灭菌的,操作应该没什么问题的,难道是试剂有问题?
5楼2014-07-21 13:24:45
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:25
引用回帖:
4楼: Originally posted by cmugaoxiaohu at 2014-07-21 13:22:31
刚提的马上做的电泳啊 ,做实验也有很长时间了,操作应该没什么问题,难道是试剂?...

所有物品都是提RNA级别的吗?操作时间长了吧,天气热你的冰盒凉吗

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-07-21 13:32:03
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yichunh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:29
试剂是有换新的还是都是之前用着好用的?跑了多长时间的电泳?电泳时间要短一些啊~
7楼2014-07-21 15:03:39
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Romaner007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:32
亲,那确实是降解了!你确定是用灭菌的?在高压灭菌锅灭的是不行的!买提取RNA专用的!还有整个提取过程都需要在冰上操作!
人的一切都应该是美丽的!
8楼2014-07-21 17:52:02
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biot

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:36
试剂的问题最大,操作只要保证物品是灭菌的就行,也不需要低温

[ 发自小木虫客户端 ]
扬帆起航!
9楼2014-07-21 19:58:05
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娜shn

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-07-22 08:38:40
引用回帖:
4楼: Originally posted by cmugaoxiaohu at 2014-07-21 13:22:31
刚提的马上做的电泳啊 ,做实验也有很长时间了,操作应该没什么问题,难道是试剂?...

现在室内温度有些高,如果操作是在冰盒上进行的,而且操作没问题,跑胶时间不是太长的话,应该就是试剂盒的问题或者是降解了了。
10楼2014-07-21 20:33:25
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