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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 试剂盒提取总RNA后电泳图
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lichao4214

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cmugaoxiaohu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-24 08:53:26
你整个流程花了好长时间呢？rna提取所用耗材都是进口的么？这个季节做，我觉得必须在冰盒上才行，还有你电泳时间长么？
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11楼2014-07-22 10:13:31
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shouhuweilai

木虫 (著名写手)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2014-07-24 08:54:08
大夏天的 该休息了，做啥分解啥，赶快放暑假吧，哈哈
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佛曰：人生在世如身处荆棘之中，心不动，人不妄动，不动则不伤；如心动则人妄动， 伤其身痛其骨，于是体会到世间诸般痛苦！
12楼2014-07-22 11:15:34
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Ranen516

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
恩！很明显降解了！RNA的提取时间要尽量短一些，动作快一点。我们实验室提的时候，会带口罩，关灯神马的！不是说RNA很容易讲解的吗！?
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13楼2014-07-22 17:01:50
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寻香海棠

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先可能是降解了。
然后就是我们这边提RNA都是用专用的墙头和ep管。
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人生得意需尽欢
14楼2014-07-23 19:55:28
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w_goodluck

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cmugaoxiaohu(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-24 08:54:57
作为一个做了半年多total rna的过来人  告诉楼主 降解了。而且是十分明显。很奇怪 降解如此严重还能测出来260/280达到2的水平。用试剂盒做的话，冰上不冰上无所谓，我认为比较关键的一点是 你用的试剂和枪头必须是RNAase-free的。高温灭菌并不能去除无所不在的RNAase，有文献报道，121℃，4个小时依然残留RNAase活性。可购买经过处理的枪头和试剂，如果没有，也可以自己用CEPC等RNA酶抑制剂进行处理。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2014-07-24 08:10:04
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w_goodluck

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by w_goodluck at 2014-07-24 08:10:04
作为一个做了半年多total rna的过来人  告诉楼主 降解了。而且是十分明显。很奇怪 降解如此严重还能测出来260/280达到2的水平。用试剂盒做的话，冰上不冰上无所谓，我认为比较关键的一点是 你用的试剂和枪头必须是R ...

补充一下 弥散带是降解的明显特征。正常的应该是两条带或三条带16s 23s 有时候会有5s rRNA。试剂盒提取的话 注意提供的试剂有没有可能被污染 如水等。另外，电泳用了多久？10分钟？15分钟？ 如果怕电泳液产生降解，可考虑提高电压至200伏。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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16楼2014-07-24 08:16:10
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定是降解，而且非常严重，妥妥的
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17楼2014-07-24 10:33:44
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bio-li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
芯片公司包抽提RNA，直接提供样本即可，可站内我
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你不能解决问题，你就会成为问题
18楼2014-07-24 14:58:06
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

降解了。物品用除RNA酶处理的，操作过程小心。一方面是细胞内源性降解，另一方面是外源性污染。
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19楼2014-07-24 17:33:47
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yingshanyu

新虫 (初入文坛)
你的问题解决了吗  我也遇到了同样的问题，不知什么原因也
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20楼2015-03-08 10:52:35
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