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laolaohutu

银虫 (正式写手)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 933.5
红花: 4
帖子: 533
在线: 167.2小时
虫号: 1724078
注册: 2012-03-29
性别: MM
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 片段采取无缝克隆重组后，测序结果正确，但用IPTG诱导后，都未见目的蛋白表达已有2人参与

片段采取无缝克隆重组后，测序结果正确，但用IPTG诱导后，都未见目的蛋白表达，向各位请教下可能存在的原因？？

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请享受无法回避的痛苦

1楼 2014-07-20 10:04:00

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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

应助: 452 (硕士)
金币: 31580.9
红花: 100
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注册: 2014-07-17
专业: 肿瘤发生

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-07-20 12:28:00
laolaohutu: 金币+5 2014-07-20 20:47:23

1、IPTG用的浓度是多少？诱导时间是多长？什么温度条件下？
2、n你的fusion protein有多大？
3、是否同时做对照？如GST的vector （假定你做的是GST fusion protein），对照有诱导否？。

2楼2014-07-20 10:43:01

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