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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 3kD的蛋白用什么条件转膜！
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lizefan

木虫 (正式写手)

[求助] 3kD的蛋白用什么条件转膜！ 已有3人参与

最近构建了个3KD的蛋白湿法转膜，200mA 1h会转过吗？用His的抗体没检测到。不知道是什么原因？谢谢！
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noimpossible！
1楼 2014-07-13 21:27:37
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lvchaoAndy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我以前做过10KD的，你可以配个17%的胶，PDF膜转之前 用甲醇泡10分钟，电转时间不要太长，会转过的，230mA 30mins
蛋白浓度高一点，抗体浓度也高一点，会很明显的
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3楼2014-07-14 11:22:00
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lubuddy

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lizefan(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-14 09:08:24
我以前是用半干转的，15V恒压半小时到一小时
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2楼2014-07-13 23:46:54
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pengchenping

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
电流有点大，可以稍微小点，时间也短些！转完之后你可以用丽春红染液染色看看先

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-07-14 12:25:11
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我是小木虫

银虫 (小有名气)
请问你找到解决办法了吗？我最近也要做，不知如何好？
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5楼2015-01-23 19:54:26
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