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nieqiantina

银虫 (初入文坛)

[求助] 我的蛋白电泳图,这样的,求高手指导。 已有7人参与

两边的marker每次都是歪的,都向外面倾斜,蓝色的没跑成一条直线,且一边快一边慢,是由于胶的浓度不均匀的原因吗,那怎么才能均匀。谢谢!!!!

我的蛋白电泳图,这样的,求高手指导。
20140710_171139.jpg
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

电泳条带歪斜,一般是因为:
1.您的凝胶制备不均匀,您不用太担心凝固,只要不早加引发剂就行,制胶时,加入药品后要用枪吹打,注意不要出现气泡。
2.插梳子时要平稳,不用太担心,胶不会一瞬间就凝,慢慢来
3.其次,您在制版时可能操作不当,导致胶面与板面出现气泡,您加胶时,在一处加入就行,不用来回走动枪。加水时,勿在一处加,尽量多加些水,这样分离胶与浓缩胶的面就较平整。
4.凝胶制备时可能没有在凝胶未聚合前保持水平或静止,导致凝胶厚度不一致。
5、你可以对制胶时用的药品,进行超声除气泡,交联剂、引发剂就不用了,因为用量少
6、建议您看看一些国外实验视频,这在优酷、爱奇艺,以及生物帮上都有
相信自己,永不言弃
8楼2014-07-14 22:59:12
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-10 22:53:40
电泳条带歪斜,一般是因为:
1.凝胶制备不好,导致胶的密度或交联程度不均匀。
2.点样孔倾斜,全都往一个方向偏,可能是梳子插入时就插倾斜了。
3.可能凝胶的底部与玻璃板接触的面上可能有气泡。
4.凝胶制备时可能没有在凝胶未聚合前保持水平或静止,导致凝胶厚度不一致。
2楼2014-07-10 18:20:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

更正:4.凝胶制备时可能灌制凝胶的模具的两块玻璃板不平行,导致凝胶厚度不一致。
3楼2014-07-10 22:35:46
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

补充:
5.缓冲液凝胶条或者点极放置不平行。
4楼2014-07-10 22:37:08
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