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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 各位大哥大姐，这是我做的SDS-PAGE蛋白质电泳的图片，没做成功，求指导
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grf2013

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位大哥大姐，这是我做的SDS-PAGE蛋白质电泳的图片，没做成功，求指导已有12人参与

这是我做的蛋白质电泳的图片，Mark本来有九条带，只跑出四条，点的蛋白质样跑成一团，请问是什么原因，如何改进更好？

各位大哥大姐，这是我做的SDS-PAGE蛋白质电泳的图片，没做成功，求指导
dell 2014-05-12 16 时 09 分.jpg
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1楼2014-05-12 17:04:07
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王丹2013

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分离胶浓度不对吧，根据目的蛋白大小选个合适的胶重新跑吧
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2楼2014-05-12 20:20:09
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶没混匀要么就是玻璃板子没擦干净……以及根据LS的建议要考虑蛋白大小来选择胶的浓度。

骚年重新来过吧……
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Permanent head Damage
3楼2014-05-12 20:37:45
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369212544

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的胶是不是还没干就开始跑电泳了？你这种情况真没遇到过
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4楼2014-05-13 07:18:33
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白话八股

金虫 (正式写手)
浓缩胶都看不到了？还有，你的上样亮，跑的电压？

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最爱的那个人会出现在身边。
5楼2014-05-13 08:11:00
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白话八股

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
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4楼: Originally posted by 369212544 at 2014-05-13 07:18:33
你的胶是不是还没干就开始跑电泳了？你这种情况真没遇到过

跑的时间呢？是不是太短了？

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最爱的那个人会出现在身边。
6楼2014-05-13 08:12:24
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grf2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 369212544 at 2014-05-13 07:18:33
你的胶是不是还没干就开始跑电泳了？你这种情况真没遇到过

胶干了才跑的，主要是买的试剂盒最大分离胶浓度为15%,我的蛋白质量低于2000.
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7楼2014-05-13 15:55:50
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grf2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 白话八股 at 2014-05-13 08:11:00
浓缩胶都看不到了？还有，你的上样亮，跑的电压？

浓缩胶在染色时切掉了，这整块是15%分离胶，电压先是80V，跑到分离胶时换120V，跑到离胶底1厘米处结束。上样量为14ul。
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8楼2014-05-13 15:59:00
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grf2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 王丹2013 at 2014-05-12 20:20:09
分离胶浓度不对吧，根据目的蛋白大小选个合适的胶重新跑吧

今天配了20%的浓缩胶跑，等待结果。我的蛋白质量低于2000，有说要用Tricine-SDS-PAG，可是买那个还要三天才能到货，等不及了。
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9楼2014-05-13 16:09:15
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
条带弥散，明显是分离胶选择的浓度不好，电压起始应该是70-80V，这个没有问题，分离胶你可以选择100V稳压，耗一些时间，结果我相信会更好一些。
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10楼2014-05-13 17:21:28
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