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独默林夕

铁虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE电泳图像与问题分析

各位行内专业人员好，我的蛋白样品是真菌发酵液中提取的蛋白，提取方法是硫酸铵盐析的方法，最后蛋白干粉用尿素、硫脲等配制的裂解液溶解的，跑完SDS-PAGE电泳条带上宽，下面窄，呈梭形，期待大家指点啊！
SDS-PAGE电泳图像与问题分析
360截图20130521154145445.jpg
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1楼 2013-05-21 15:42:25
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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独默林夕: 金币+3 2013-05-22 15:00:42
楼主跑胶时在空白的点样孔里也要加裂解溶液(marker也要加), 这样每一条泳道会均一.
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2楼2013-05-21 20:20:36
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nixilu110

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能与空白的泳道有关，可以在空白泳道点上样缓冲液
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3楼2013-05-21 22:20:30
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一个小术士

木虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议楼主透析一下，可能是杂质太多影响电泳结果，我之前也遇到过类似情况
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4楼2013-05-22 00:53:34
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一个小术士 at 2013-05-22 00:53:34
建议楼主透析一下，可能是杂质太多影响电泳结果，我之前也遇到过类似情况

谢谢提议，请问与杂质 类型有关吗，我透析时间挺长的了，有3-4天呢，一天换2-3次水，跑胶时有样品的泳道前端呈椭圆形泡状
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5楼2013-05-22 14:27:59
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edoz1986

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
表示有可能你的胶或者缓冲液有问题！
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6楼2013-05-24 15:52:39
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独默林夕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by edoz1986 at 2013-05-24 15:52:39
表示有可能你的胶或者缓冲液有问题！

不过同样的胶与缓冲液，跑其他同学的样品都没问题呢
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7楼2013-05-26 08:28:50
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DBWJ

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
建议你加个MAKER跑一下，如果MAKER也有问题可能就是胶的问题了，顺便问一下你电泳条件是什么呀？
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8楼2013-05-28 10:48:36
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