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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于磷酸化蛋白质SDS-PAGE电泳图
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李金娜322

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于磷酸化蛋白质SDS-PAGE电泳图已有3人参与

我是提磷酸化蛋白质的~~这是我提完蛋白质的SDS-PAGE凝胶电泳图片 但不知道为什么会这样  请求高手指教
关于磷酸化蛋白质SDS-PAGE电泳图
ljn.jpg
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1楼2014-01-09 17:22:29
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhixuec

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一张是因为你的上样孔脏东西、杂质颗粒造成的，以前我也遇到到，一定要把梳子洗干净了再用

第二张图 上面都有说的，就是样品含有太多杂质，不知道你用什么buffer沉淀的蛋白，若是TCA-丙酮的话，可能是丙酮没有挥发干净
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李金娜322
酷爱の族
6楼2014-01-10 09:24:30
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albertcalvin

新虫 (初入文坛)
首先是配好胶，其次，电泳buffer过一次滤膜可能会有点效果
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李金娜322
世界上最美的花朵是人的头脑
11楼2014-08-13 19:02:47
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普通回帖

tingyusu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看到你的第一张图片条带明显有竖着的条纹，估计是你的胶没有做好吧。同求高手指点~
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2楼2014-01-09 19:13:39
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aoaoshch

木虫 (小有名气)
没有MARKER吗？可能胶的质量不好，另外，样品感觉很杂，好像有很多多糖或甘油啊，从头拖到尾。
建议，重新配胶吧，样品用超滤管过一下，除除杂质。
同求高手指点~
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3楼2014-01-09 19:28:54
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suwc2013

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-09 23:03:57
李金娜322: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-01-10 14:32:49
1、可能你的蛋白溶液里含盐较高 2、还有你上样量减少点3、跑胶的buffer用新的不要用旧的，祝福楼主。
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李金娜322
。。。。。。。。
4楼2014-01-09 19:32:37
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suwc2013

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你的蛋白溶液可能有triton  感觉的蛋溶液挺杂的
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。。。。。。。。
5楼2014-01-10 09:04:27
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李金娜322

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tingyusu at 2014-01-09 19:13:39
看到你的第一张图片条带明显有竖着的条纹，估计是你的胶没有做好吧。同求高手指点~

谢谢您

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2014-01-10 10:51:40
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李金娜322

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by aoaoshch at 2014-01-09 19:28:54
没有MARKER吗？可能胶的质量不好，另外，样品感觉很杂，好像有很多多糖或甘油啊，从头拖到尾。
建议，重新配胶吧，样品用超滤管过一下，除除杂质。
同求高手指点~

谢谢您
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8楼2014-01-10 14:23:09
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李金娜322

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by suwc2013 at 2014-01-09 19:32:37
1、可能你的蛋白溶液里含盐较高 2、还有你上样量减少点3、跑胶的buffer用新的不要用旧的，祝福楼主。

buffer 确实是旧的
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9楼2014-01-10 14:24:10
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李金娜322

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhixuec at 2014-01-10 09:24:30
第一张是因为你的上样孔脏东西、杂质颗粒造成的，以前我也遇到到，一定要把梳子洗干净了再用

第二张图 上面都有说的，就是样品含有太多杂质，不知道你用什么buffer沉淀的蛋白，若是TCA-丙酮的话，可能是丙酮没有 ...

我用抽酚法提的磷酸化蛋白质  提完后需要用丙酮洗 可能是丙酮没有挥发干净 我提完蛋白质需要抽真空抽成干粉 之后在复溶 也是不知道那个环节出问题了~~·谢谢您的宝贵意见
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10楼2014-01-10 14:27:52
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