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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 同一个蛋白有不同的等电点？
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carriexiang

新虫 (初入文坛)

[求助] 同一个蛋白有不同的等电点？

同一个蛋白有不同的等电点是什么原因呢？做2D 的时候其中两个点打出来的蛋白是一样的，这两个点处于不一样的pI位置，一样的Mw.
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1楼 2013-05-08 23:20:22
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
carriexiang(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-09 08:15:39
序列一样的蛋白质只有一个PI。蛋白质修饰造成的，如果不是细胞内翻译后修饰，就是跑胶时样品制备时化学修饰，如acrylamide修饰，氧化，不纯尿素修饰等，非常常见
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2楼2013-05-09 01:34:42
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
carriexiang(myprayer代发): 金币+1, 新虫子的首贴，加油哇。赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。同样期待你更详细的应助指导。 2013-05-09 08:15:54
你的两个点pI差多少？磷酸化会显著影响蛋白的pI.
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3楼2013-05-09 02:16:57
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carriexiang

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-09 02:16:57
你的两个点pI差多少？磷酸化会显著影响蛋白的pI.

具体没有计算，大概小于1吧
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4楼2013-05-09 03:05:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

你可以试试用pro-Q染一下胶看磷酸化蛋白。
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5楼2013-05-09 12:15:47
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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carriexiang(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-09 13:02:40
正如以上等人所说，这两个蛋白是同工酶！蛋白可能被甲基化，乙酰基化，磷酸化修饰！生物学性质相同，但理化性质不同！
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长得比我英俊的，没我有才华！有才华的，没我长得俊！
6楼2013-05-09 12:40:30
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
carriexiang(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-09 20:56:03
可能由三种情况：
1.序列一样的蛋白质不一定只有一个PI，等电点本质上是反映其的分子表面的电荷情况，如果蛋白质发生了不同形态的折叠，PI就可能不一样。这样的情况比较少见。
2.另外，不带明显的电荷的分子量较小的共价修饰可能也会造成被修饰的蛋白质的等电点发生改变，单纯用电泳可能检测不出来，比如甲基化、小分子糖基化等；再有蛋白质发生非共价凝聚也可能会出现等电点改变，楼主的双向电泳第二向用SDS-PAGE可能是蛋白质单体或者亚基的图像，PI则是可能是有一部分蛋白质发生非共价凝聚体或多亚基蛋白质的图象；楼主的双向电泳第二向用SDS-PAGE，这时也不能排除蛋白质在走PI时其中一中发生了磷酸化、硫酸化等带有电荷的共价修饰，因为SDS-PAGE电泳时掩盖了蛋白质的自身电荷。
3.PI不相同的两个点根本就不是同一个蛋白质，它们只是分子量相同或者亚基的分子量相同而已，氨基酸序列可能差别很大，也不一定是同工酶，因为没有检测它们的生物功能是不是一样。
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7楼2013-05-09 14:41:27
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zhouxj

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-05-09 14:41:27
可能由三种情况：
1.序列一样的蛋白质不一定只有一个PI，等电点本质上是反映其的分子表面的电荷情况，如果蛋白质发生了不同形态的折叠，PI就可能不一样。这样的情况比较少见。
2.另外，不带明显的电荷的分子量较小 ...

非常合理
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8楼2013-09-03 16:25:57
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