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关于磷酸化蛋白质SDS-PAGE电泳图
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李金娜322
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专业: 植物学研究的新技术、新方
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关于磷酸化蛋白质SDS-PAGE电泳图
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我是提磷酸化蛋白质的~~这是我提完蛋白质的SDS-PAGE凝胶电泳图片 但不知道为什么会这样 请求高手指教
ljn.jpg
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1楼
2014-01-09 17:22:29
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李金娜322
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专业: 植物学研究的新技术、新方
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引用回帖:
6楼
:
Originally posted by
zhixuec
at 2014-01-10 09:24:30
第一张是因为你的上样孔脏东西、杂质颗粒造成的,以前我也遇到到,一定要把梳子洗干净了再用
第二张图 上面都有说的,就是样品含有太多杂质,不知道你用什么buffer沉淀的蛋白,若是TCA-丙酮的话,可能是丙酮没有 ...
我用抽酚法提的磷酸化蛋白质 提完后需要用丙酮洗 可能是丙酮没有挥发干净 我提完蛋白质需要抽真空抽成干粉 之后在复溶 也是不知道那个环节出问题了~~·谢谢您的宝贵意见
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10楼
2014-01-10 14:27:52
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tingyusu
铁虫
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虫号: 1762227
注册: 2012-04-18
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
看到你的第一张图片条带明显有竖着的条纹,估计是你的胶没有做好吧。同求高手指点~
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2楼
2014-01-09 19:13:39
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aoaoshch
木虫
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应助: 18
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金币: 2646.2
红花: 3
帖子: 153
在线: 105小时
虫号: 800123
注册: 2009-06-28
性别: GG
专业: 生物化学
没有MARKER吗?可能胶的质量不好,另外,样品感觉很杂,好像有很多多糖或甘油啊,从头拖到尾。
建议,重新配胶吧,样品用超滤管过一下,除除杂质。
同求高手指点~
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3楼
2014-01-09 19:28:54
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suwc2013
金虫
(著名写手)
应助: 10
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散金: 15
红花: 4
帖子: 1510
在线: 88.8小时
虫号: 2424627
注册: 2013-04-18
专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2014-01-09 23:03:57
李金娜322: 金币+10,
★★★
很有帮助
2014-01-10 14:32:49
1、可能你的蛋白溶液里含盐较高 2、还有你上样量减少点3、跑胶的buffer用新的不要用旧的,祝福楼主。
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李金娜322
。。。。。。。。
4楼
2014-01-09 19:32:37
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