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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 我的蛋白电泳图，这样的，求高手指导。
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nieqiantina

银虫 (初入文坛)

[求助] 我的蛋白电泳图，这样的，求高手指导。 已有7人参与

两边的marker每次都是歪的，都向外面倾斜，蓝色的没跑成一条直线，且一边快一边慢，是由于胶的浓度不均匀的原因吗，那怎么才能均匀。谢谢！！！！

我的蛋白电泳图，这样的，求高手指导。
20140710_171139.jpg
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1楼 2014-07-10 17:17:44
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-10 22:53:40
电泳条带歪斜，一般是因为：
1.凝胶制备不好，导致胶的密度或交联程度不均匀。
2.点样孔倾斜，全都往一个方向偏，可能是梳子插入时就插倾斜了。
3.可能凝胶的底部与玻璃板接触的面上可能有气泡。
4.凝胶制备时可能没有在凝胶未聚合前保持水平或静止，导致凝胶厚度不一致。
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2楼2014-07-10 18:20:22
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

更正：4.凝胶制备时可能灌制凝胶的模具的两块玻璃板不平行，导致凝胶厚度不一致。
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3楼2014-07-10 22:35:46
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

补充：
5.缓冲液凝胶条或者点极放置不平行。
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4楼2014-07-10 22:37:08
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

估计是没有混匀体系，也没有脱气，就急忙忙地上胶了，不用怕，胶不会那么快就凝结的。或者把诱发剂减量，延长交联时间。
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自然如此美丽！
5楼2014-07-14 09:55:15
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pengchenping

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得最主要的应该是你的胶没有混匀，配胶不应该没有压平还把浓缩胶灌上去吧。另外也有可能是你用水封的时候力道太大且不均匀，导致右边的胶被稀释啦

[ 发自小木虫客户端 ]
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6楼2014-07-14 12:33:57
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

样品中的蛋白量太高会把marker挤成这样。
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7楼2014-07-14 14:25:02
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

电泳条带歪斜，一般是因为：
1.您的凝胶制备不均匀，您不用太担心凝固，只要不早加引发剂就行，制胶时，加入药品后要用枪吹打，注意不要出现气泡。
2.插梳子时要平稳，不用太担心，胶不会一瞬间就凝，慢慢来
3.其次，您在制版时可能操作不当，导致胶面与板面出现气泡，您加胶时，在一处加入就行，不用来回走动枪。加水时，勿在一处加，尽量多加些水，这样分离胶与浓缩胶的面就较平整。
4.凝胶制备时可能没有在凝胶未聚合前保持水平或静止，导致凝胶厚度不一致。
5、你可以对制胶时用的药品，进行超声除气泡，交联剂、引发剂就不用了，因为用量少
6、建议您看看一些国外实验视频，这在优酷、爱奇艺，以及生物帮上都有
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相信自己，永不言弃
8楼2014-07-14 22:59:12
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protein780

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有可能是的跑胶的过程漏液了，或者靠近marker的泳道蛋白浓度太高了。
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9楼2014-07-24 13:01:29
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spiderboy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

呵呵，楼主的情况，我前天刚碰到过。楼上说的都有道理，不过我认为我的情况都不是楼上说的情况。我开始也以为是主要是胶制作的问题。但是，因为我的两块胶是面对面一起跑电泳的，跑的时候溴酚蓝却是在同一侧倾斜，所以胶应该没问题。
     这个情况明显是一边电流大，一边电流小。所以明显是电泳液或者电泳装备等的某个因素出了问题，导致这个情况。后来重新清洗了遍装备，电极什么的也换了下接口，就好了。感觉这个现象很偶然。因为之前设备都没啥问题。
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10楼2014-07-24 15:03:19
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