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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 只涂感受态细胞的平板也长出了菌落？
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匿名

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1楼 2014-07-07 08:45:01
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niutao80

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 13:10:49
氨苄失效了吧，你最好先确定氨苄是不是好的
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予人玫瑰手留余香
2楼2014-07-07 09:20:17
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diqilvyinyun

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 13:10:55
感受态是否污染了有质粒的菌

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为梦想而努力！
3楼2014-07-07 10:05:40
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 13:11:04
gyesang: 回帖置顶 2014-07-07 13:11:06
第一，安苄板容易失效（所以我一般用卡那做对照）。第二，感受态制备过程中染菌了。第三，转化后的板不要放太长时间，12个小时足以

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天道酬勤
4楼2014-07-07 10:17:56
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匿名

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5楼2014-07-07 10:27:04
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by harmonizor at 2014-07-07 10:27:04
我的感受态是买的天根的，应该没问题吧...

好土豪~我们感受态都不让买。那应该是没问题。可能就是抗生素的问题了

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天道酬勤
6楼2014-07-07 10:29:06
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匿名

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7楼2014-07-07 10:33:01
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by harmonizor at 2014-07-07 10:33:01
请问怎么避免假阳性产生，我的转化假阳性很多的说。。。...

避免假阳性？应该没有这样的说法吧。唯一就是确保你的双酶切都切开了

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天道酬勤
8楼2014-07-07 10:44:09
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jamesfeng

铁虫 (初入文坛)
原因很多，首先你看你所有的平板是不是同一批次的。其次有可能是你在制备感受态过程中，操作不规范污染了杂菌，还有就是再检查下转化的空白plasmid 有没有拿错。制备好的competent建议放置在-80冰箱密闭保存
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9楼2014-07-09 10:10:46
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lq102021

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得是感受态污染了
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10楼2015-05-07 08:06:56
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