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汕头大学海洋科学接受调剂
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rainontime

新虫 (小有名气)

[求助] 平板上一层白白的到底是什么???

本人将8uL连接产物加到160uL感受态细胞后,热击转化,加800uL培养基摇菌50分钟,离心,留200UL涂两块平板,但是过夜后,平板上总有一层白白的东西。。。。。。在白白的东西上面有几个很小的菌落。。。

不知道是污染了,还是白白的感受态细胞。。。。。

我的培养基,抗生素什么的都是新的。。。。

连续两次都是这样了。。。。求解答,谢谢!!!!
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
rainontime(金币+1): 不是很确切 2011-08-12 14:16:39
西瓜(金币+4): 鼓励交流 2011-08-12 17:45:20
rainontime(金币+1): 2011-10-19 14:59:07
按照楼主的描述,个人觉得不可能染菌,应该是背景,一般情况下在用到氨苄青霉素和唆卞青霉素的时候,涂布以后,过上一段时间,板子上就会长出来背景,就感觉没有涂开或者是染菌了一样,开始我也觉得是染菌了或者没有涂布开,后来长的时间长了,单克隆就会长出来,背景就会慢慢变淡甚至消失的,这个不用担心,等单克隆长出来直接挑单克隆划线验证就可以了。

如果能上图的话就更好了。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-12 09:49:36
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-12 17:47:00
rainontime(金币+2): 可不就是涂得太浓了。。。 2011-10-19 14:59:38
是不是楼主涂菌太多了!我们一般用50ul感受态!
jiayoubashaonian
3楼2011-08-12 10:42:36
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rainontime

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-12 09:49:36:
按照楼主的描述,个人觉得不可能染菌,应该是背景,一般情况下在用到氨苄青霉素和唆卞青霉素的时候,涂布以后,过上一段时间,板子上就会长出来背景,就感觉没有涂开或者是染菌了一样,开始我也觉得是染菌了或者没 ...

我CaCl2没有灭菌。。。。会不会造成污染啊?
我用的是卡纳抗生素
4楼2011-08-12 11:28:16
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): 感受态污染了还是个问题。。 2011-08-12 17:47:32
rainontime(金币+1): 2011-10-19 14:59:46
如果用的卡纳霉素,氯化钙也没有灭菌,有可能是染菌了;只是有可能,当然了,你现在平板上不是长可单菌落吗?挑出来直接验证不就OK了?
验证也花不了多长时间。。。。
祝好运!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2011-08-12 14:19:50
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eileen8519

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我没遇到过楼主的情况,不过最好挑菌培养,然后验证一下!主要能获得我们要的阳性克隆就可以啦!
6楼2011-09-27 16:58:09
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