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寻香海棠新虫 (初入文坛)
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[求助]
关于菌落PCR，请教高手几个问题！ 已有4人参与
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最开始做的时候用机器里之前师兄师姐设定的程序如下： 95℃ 3min 95℃ 30s 55℃ 30s 72℃ 25s 72℃ 10min 使用通用引物，两次都没成功，后来发现延伸时间太短，设为1min30s后，7个菌成功了4个，还有3个我按照修改后的方法来做仍然没有一个成功！这是什么回事呢？ 然后我分析可能是预变性时间太短，没有将细胞壁裂解，打算设为10min，同时担心挑入培养基进入体系干扰实验，打算将液体培养的菌液离心取适量菌体。 请问大神这样做合不合适？还有什么可以改进的吗？ |
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zgb1982
木虫 (正式写手)
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8楼2014-07-06 10:47:06