根据参考文献进行的PCR扩增,阳性菌株条带正常,待测菌株有一些正常检出,一些只能检测出部分基因。
25μl反应体系,用的takara的预混酶,94℃,4min。94℃,30s;59℃,30s;72℃,45s--10循环。94℃,30s;52℃,30s;72℃,45s--25循环。72℃,10min。
我检测的目的基因有金黄色葡萄球菌16s基因(756bp),耐甲氧西林mecA基因(310bp)。
MARKER条带从上到下分别为:1000,700,500,400,300,200,100.
1-6号都是金黄色葡萄球菌,1、2号都有16s的目的条带,但是3-6号只有mecA基因的扩增条带(我用单重PCR方法单独扩增16s,可以扩增得到所有的目的条带)
请问大家有什么改进的建议呢?
![不知道我的多重PCR哪里出问题了?请高手指教!]()
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