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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 荧光定量PCR可以看到产物大小吗？
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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量PCR可以看到产物大小吗？ 已有4人参与

荧光定量PCR可以看到产物大小吗？荧光定量PCR不是用于定量的吗？还有假如多重荧光定量PCR，针对8种病原体，如何区分你得到的产物是哪种病原体的呢？
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1楼 2014-05-17 19:13:44
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燕归来0101

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
永远一片天: 金币+1, ★有帮助 2014-05-23 10:52:14
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-23 11:05:25
好像能看溶解曲线出峰的温度判断是不是同种产物吧，产物大小应该看不出来的。
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2楼2014-05-22 21:29:52
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DAX1

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
永远一片天: 金币+1, ★有帮助 2014-05-23 10:50:24
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-23 11:05:52
你可以将pcr产物跑琼脂糖电泳看大小，至于区分不同病原体，你得设计特异的引物啊。8种就设计8种引物
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3楼2014-05-22 22:27:55
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永远一片天

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by DAX1 at 2014-05-22 22:27:55
你可以将pcr产物跑琼脂糖电泳看大小，至于区分不同病原体，你得设计特异的引物啊。8种就设计8种引物

您好，我还是搞不清楚一个荧光多重PCR怎么区分产物，就算设计了特异性引物，可是，荧光只能定量，但有8个模板，如何知道这个产物是哪一种呢
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4楼2014-05-23 10:52:03
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vege的桌子

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-05-23 10:52:03
您好，我还是搞不清楚一个荧光多重PCR怎么区分产物，就算设计了特异性引物，可是，荧光只能定量，但有8个模板，如何知道这个产物是哪一种呢...

产物片段TM值不一样就可以用溶解曲线区分啦
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5楼2014-05-23 11:02:20
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DAX1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 永远一片天 at 2014-05-23 10:52:03
您好，我还是搞不清楚一个荧光多重PCR怎么区分产物，就算设计了特异性引物，可是，荧光只能定量，但有8个模板，如何知道这个产物是哪一种呢...

比如说，你设计了A引物针对a模板，那么A引物对其他模板的扩增效率肯定很低（前提是你的A引物的特异性很高），因为引物不匹配啊。这样你就可以通过荧光强度来定量你的表达水平了
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6楼2014-05-23 15:51:49
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wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

多重荧光是不同的探针用不同的荧光基团标记，这样就能区分了
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7楼2014-05-23 16:28:50
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