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aofeng860308木虫 (正式写手)
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GST纯化，洗脱时不出峰，检测有蛋白。 已有3人参与
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如题，纯化一个带GST标签的蛋白，裂解Buffer和平衡Buffer为PBS+5%Triton x-100，洗脱Buffer为50mM Tris-Hcl+10mM 还原型谷胱甘肽。洗脱时，不但不出峰，峰值反倒出现负值，而且负得很多，-2000mAU左右。将收集的样品进行SDS-PAGE，发现洗脱中有目的蛋白，只是量不多。 想请教一下大神们，为什么会不出峰，反而会出现负值，之前纯化过的都是正常的。 |
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