| 查看: 1779 | 回复: 5 | |||
aofeng860308木虫 (正式写手)
|
[求助]
GST纯化，洗脱时不出峰，检测有蛋白。 已有3人参与
|
|
如题，纯化一个带GST标签的蛋白，裂解Buffer和平衡Buffer为PBS+5%Triton x-100，洗脱Buffer为50mM Tris-Hcl+10mM 还原型谷胱甘肽。洗脱时，不但不出峰，峰值反倒出现负值，而且负得很多，-2000mAU左右。将收集的样品进行SDS-PAGE，发现洗脱中有目的蛋白，只是量不多。 想请教一下大神们，为什么会不出峰，反而会出现负值，之前纯化过的都是正常的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有4人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有18人回复
-
国自然评审意见
已经有15人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有13人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有14人回复
-
系统查不到
已经有11人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊
已经有27人回复
- 镍柱纯化His标签蛋白，洗脱不下来
已经有11人回复
- 色谱检测时不出峰怎么办
已经有9人回复
- 求助！关于GST标签蛋白纯化问题~！
已经有3人回复
- 进样后HPLC不出峰，出现很多信号弱的毛刺东西！
已经有15人回复
- 用 气质联用检测水中的双酚A 不出峰
已经有6人回复
- 正相柱检测不出峰的问题
已经有14人回复
- GST蛋白纯化柱子
已经有6人回复
- HPLC单标进样出峰，而用混标进样梯度洗脱不出峰
已经有5人回复
- 用液质时内标物不出峰
已经有19人回复
- GST融合蛋白洗脱时洗脱不下来，怎么办
已经有9人回复
- 求助！关于GST融合蛋白纯化！楼主愁得一夜没有睡好！
已经有20人回复
- 出峰时间提前，峰面积减小为1/10，标样不出峰，求解
已经有17人回复
- 带GST标签的融合蛋白的纯化问题——急急急
已经有4人回复
- GST柱纯化蛋白 是否变性
已经有6人回复
- 请教大家hplc不出峰的问题
已经有13人回复
- gst标签蛋白的表达和纯化
已经有17人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- gst标签，蛋白纯化
已经有25人回复
- GST融合蛋白纯化求助 ！！！
已经有19人回复
- 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化？
已经有14人回复
- 【求助】求助，LC-MS不出峰
已经有23人回复
Davie_Meagen
新虫 (初入文坛)
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 253.3
- 帖子: 29
- 在线: 9.5小时
- 虫号: 3096145
- 注册: 2014-03-28
- 性别: GG
- 专业: 生物地球化学
2楼2014-06-17 15:57:47
aofeng860308
木虫 (正式写手)
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3661.4
- 散金: 145
- 红花: 5
- 帖子: 497
- 在线: 531.1小时
- 虫号: 938003
- 注册: 2010-01-06
- 性别: GG
- 专业: 环境分析化学
3楼2014-06-17 16:59:57
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2155
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3301
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
4楼2014-06-17 21:03:44
wolfman840
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 225 (大学生)
- 金币: 3524.8
- 散金: 20
- 红花: 12
- 帖子: 702
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 902627
- 注册: 2009-11-14
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
5楼2014-07-03 13:30:25
pudding9696
无虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: -137.6
- 散金: 335
- 红花: 1
- 帖子: 218
- 在线: 62小时
- 虫号: 1868605
- 注册: 2012-06-24
- 专业: 多脏器衰竭
6楼2014-07-04 14:18:17
10