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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请教大家hplc不出峰的问题
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pierce6175

木虫 (初入文坛)

[求助] 请教大家hplc不出峰的问题

岛津 lc-10at
SPD-10Avp紫外-可见检测器、N2000色谱数据工作站.
TLC条件 PE:CH2Cl2 = 1:2 Rf=0.4-0.5
我用紫外测得最大吸收峰307，在此波长下以纯甲醇为流动相,两次90分钟都未见出峰。
流速1ml/min
sinochrom ods-bp柱。
请教大家是什么原因，流动相极性，柱子不合适，波长不对？
还是别的原因，我是新手，还望大家多多指教。
另外，还有个更外行的问题，每次关闭n2000，总是提示“通道1正在检查基线或采集数据，请先关闭”，是怎么回事啊。

谢谢大家。
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1楼 2012-02-18 21:49:05
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+10): ★有帮助 2012-02-19 11:48:25
先查阅相关文献，了解该物质的液相分析方法。再开始条件摸索和调试。
波长选择应该没有问题。
先调流动相比例吧（极性），100%甲醇或乙腈到10%，试试看。
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守候在风中的宁静。
2楼2012-02-18 22:37:05
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laohan155

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+5): ★有帮助 2012-02-19 20:40:18
你换一下正相柱子试试，我感觉你的样品极性很小，甲醇不一定能洗脱下来。
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3楼2012-02-19 11:50:22
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 感谢专业解答 2012-02-19 19:31:34
pierce6175(金币+20): ★★★很有帮助 2012-02-19 20:41:45
1、检查氘灯是否点燃（好像设”1“是OFF，“2”是ON）。
2、看检测器上是不是显示“307nm  over”，如果是，按调零。也说明氘灯
    能量可能不够。
3、检查信号线是否松动，主要是连接N2000工作站上的信号线，其次是
   检测器、电脑上插口是否松；如果是这样，你会发现，进样后不单不出
  峰，而且基线很直，没有任何波动。
4、关闭N2000，提示“通道1正在检查基线或采集数据，请先关闭”，是
  告诉你先停止采集或停止查看基线，因关闭N2000时，你的工作站正在
  查看基线或者正在采集数据。
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4楼2012-02-19 12:01:21
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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1、检查氘灯是否点燃（好像设”1“是OFF，“2”是ON）。
2、看检测器上是不是显示“307nm  over”，如果是，按调零。也说明氘灯
    能量可能不够。
3、检查信号线是否松动，主要是连接N2000工作站上的信号线，其次是
   检测器、电脑上插口是否松；如果是这样，你会发现，进样后不单不出
  峰，而且基线很直，没有任何波动。
4、关闭N2000，提示“通道1正在检查基线或采集数据，请先关闭”，是
  告诉你先停止采集或停止查看基线，因关闭N2000时，你的工作站正在
  查看基线或者正在采集数据。
再补充一点：
5、工作站有两个通道，是不是用错了通道，打开通道2试试。
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5楼2012-02-19 12:10:42
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zhangxb8988

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+3): 2012-02-19 20:42:22
样品浓度呢，建议你先把你的物质做一个之外可见吸收谱。
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6楼2012-02-19 12:40:02
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补天士Sai

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+5): ★有帮助 2012-02-19 20:42:47
我也是新人，分析波长应该没问题，主要是流动相和柱子的问题可能性比较大，先试试肯定能出峰的样品,之后改改流动相试试？n2000没用过，是不是应该先把电脑上的程序关了呀
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只要活着，哪里都是天堂！
7楼2012-02-19 15:29:50
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zxglcf

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+3): ★有帮助 2012-02-20 16:22:14
化合物的性质应该搞清楚，用纯甲醇不一定好使，根据化合物的PKA值调整合适的流动相，这才是正道。
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8楼2012-02-20 13:52:16
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deepwaterh

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
408851978(金币+1): 鼓励应助 2012-02-20 18:13:15
pierce6175(金币+2): ★有帮助 2012-02-20 19:42:48
SinoChrom ODS-BP,适用于亲水性样品的分离,在含高比例水的流动相条件下具有强的保留,在水系流动相中具有更长的色谱柱寿命

有可能是柱子选择不合适，换根色谱柱试试！
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9楼2012-02-20 17:42:53
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
pierce6175(金币+2): ★有帮助 2012-02-20 19:42:57
先将基线或者采集按钮点击一下，停止基线查看或者数据采集
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奋斗是金！
10楼2012-02-20 18:12:57
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