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hq1219

银虫 (小有名气)

[求助] 正相柱检测不出峰的问题已有6人参与

我最近在做硅胶柱检测含量,因是第一次接触,所以有些地方不懂,还请大家帮忙分析。该条件用的是正相柱,但是用的是反相条件:乙腈-甲醇-磷酸溶液,走梯度,结果老是不出峰 (  正常情况应该是8.4min出峰的)
流动相梯度:0-4min     乙腈-甲醇-0.5%磷酸=90:8:2
                     4-12min   乙腈-甲醇-0.5%磷酸=60:35:5
                      12-16min  乙腈-甲醇-0.5%磷酸=90:8:2
正相柱检测不出峰的问题
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正相柱检测不出峰的问题-1
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问是有具体要求么,为什么用正向柱,用反向的流动相呢??
静于心,睿于智
2楼2013-07-01 14:25:48
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fengzi913

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hq1219(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2013-07-01 22:27:32
正相柱一般都不用水的。都是异丙醇:环己烷调极性即可
3楼2013-07-01 14:34:47
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hq1219

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 河边的芦苇 at 2013-07-01 14:25:48
请问是有具体要求么,为什么用正向柱,用反向的流动相呢??

因为该主药有多个同分异构体,用反相的流动相出峰很多,我们的主要目的是把这些峰集中成一个峰,所以就是正相柱子检测了
4楼2013-07-01 15:46:11
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lzx0018love

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hq1219(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2013-07-01 22:28:11
你可真是心大!!正相柱跑反相?流动相你就有问题!!你再回去看看柱子的分离原理比较好,正相一般都为吸附色谱,用无水溶剂较多,也可以用水但是这是分配色谱!!
一切都会好的!!
5楼2013-07-01 16:07:07
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hq1219

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lzx0018love at 2013-07-01 16:07:07
你可真是心大!!正相柱跑反相?流动相你就有问题!!你再回去看看柱子的分离原理比较好,正相一般都为吸附色谱,用无水溶剂较多,也可以用水但是这是分配色谱!!

我们也觉得奇怪,可是这个条件有人做出来了的  上面还批了的,我只是重现一下他的方法
6楼2013-07-01 16:30:10
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yxyyjhx

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hq1219(zhychen2008代发): 金币+2, 多谢回帖交流 2013-07-01 22:28:37
hq1219: 金币+1, 有帮助 2013-07-02 11:35:45
感觉是你的溶剂极性太大,组分在柱子上的保留时间太短了,也就是说东西没又在柱子上停留,直接随你的流动相冲走了。
探索永无止境!
7楼2013-07-01 20:28:05
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hq1219: 金币+1, 有帮助 2013-07-02 11:35:57
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流,欢迎常来哦。 2013-07-03 08:37:57
用正相柱跑反相流动相,出峰不快才怪呢!还是用正已烷与醇类为流动相组成,摸个合适的比例算了,峰型不好,再加点调节剂比如说碱性的(二乙胺或三乙胺)与酸性的(三氟乙酸或乙酸之类的),可不要用水,甚至有机相都要脱下水的
gwmgyp
8楼2013-07-02 07:39:06
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

★ ★
hq1219: 金币+1, 有帮助 2013-07-02 15:36:02
痴夷子皮: 金币+1, 谢谢交流 2013-07-03 08:38:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by hq1219 at 2013-07-01 15:46:11
因为该主药有多个同分异构体,用反相的流动相出峰很多,我们的主要目的是把这些峰集中成一个峰,所以就是正相柱子检测了...

给你建议就是要不改用正像条件像8楼说的,要不就换反向柱,反向柱有很多种的,条件也可以适当变化,肯定可以吧你要的峰聚到一起,再说了,同分异构体,不是你想分想分就能分开的,不容易的,我们做过几次都分不开~~~~正好符合你的要求,可以试一下的~~
静于心,睿于智
9楼2013-07-02 15:00:39
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乖乖球251

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

有的手性柱确实可以走反相,可以看看柱子的说明书,在优化一下条件看看
10楼2014-05-15 10:40:40
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