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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 多糖纯化时苯酚硫酸检测的问题
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yingyu06

铜虫 (小有名气)

[求助] 多糖纯化时苯酚硫酸检测的问题

我想请问，多糖在用柱层析纯化时，文献上都说用苯酚硫酸法检测，直到检测不出多糖停止收集，洗脱峰也根据硫酸苯酚法的吸收值来画。那用苯酚硫酸检测的时候是和做标准曲线一样的方法吗？也是取2mL多糖，加1ml苯酚，5mL浓硫酸？
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1楼 2011-10-27 15:56:25
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kobeshijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

您为什么不用示差来检测啊？
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2楼2011-10-27 16:00:03
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-10-27 16:53:19
yingyu06(金币+5): 谢谢：-） 2011-11-03 16:37:09
柱色谱按时间收集的组分也是按相应的苯酚硫酸法测定。
但是多糖溶液的用量不一定非要2ML
如果收集时间间隔短，可能收集不到2ml，可以加蒸馏水到2ml后再测定
如果多于2ml，可以吸取部分加蒸馏水定容或者直接吸取2ml
不过最好还是用示差检测，得到的数据比较稳定
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边学边问，才有学问。
3楼2011-10-27 16:51:58
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yingyu06

铜虫 (小有名气)
因为没有仪器啊
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4楼2011-10-27 21:58:36
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yingyu06

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 豆哥 at 2011-10-27 16:51:58:
柱色谱按时间收集的组分也是按相应的苯酚硫酸法测定。
但是多糖溶液的用量不一定非要2ML
如果收集时间间隔短，可能收集不到2ml，可以加蒸馏水到2ml后再测定
如果多于2ml，可以吸取部分加蒸馏水定容或者直接吸取 ...

还有一个问题，请问在做多糖洗脱曲线的时候一般不是以管数为横坐标，吸光度为纵坐标吗，如果加蒸馏水稀释的话做的是不是就不准确了呢？
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5楼2011-10-27 22:02:23
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豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主
管数、时间都可以作为横坐标
加蒸馏水稀释可以换算成原始的值，如果操作没有问题的话不会有误差。
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边学边问，才有学问。
6楼2011-10-28 08:12:09
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论！ 2011-10-29 20:10:24
我做过多糖的测定，做标曲和样品含量测定时的比例必须一样，不过反应量不用那么大啊，浓硫酸用多了也危险的。
特别注意的是实验操作一定要同一个人来做，减少实验误差，浓硫酸的加入速度也不能太快，否则实验很不准，要缓慢加入。
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只为活个问心无愧。。
7楼2011-10-29 16:11:25
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sz168

禁言 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2011-11-05 16:15:48
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龙猫2585

铁虫 (初入文坛)
0.2ml糖0.4ml6%苯酚1ml浓硫酸肉眼观察足以
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Thinkingstorm
9楼2012-03-05 21:57:59
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七AND七

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3094573楼: Originally posted by kobeshijian at 2011-10-27 16:00:03:
您为什么不用示差来检测啊？

你好！示差检测多糖准确么？
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10楼2012-03-27 11:43:03
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