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yingyu06

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[求助] 多糖纯化时苯酚硫酸检测的问题

我想请问，多糖在用柱层析纯化时，文献上都说用苯酚硫酸法检测，直到检测不出多糖停止收集，洗脱峰也根据硫酸苯酚法的吸收值来画。那用苯酚硫酸检测的时候是和做标准曲线一样的方法吗？也是取2mL多糖，加1ml苯酚，5mL浓硫酸？

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1楼 2011-10-27 15:56:25

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kobeshijian

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【答案】应助回帖

您为什么不用示差来检测啊？

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2楼2011-10-27 16:00:03

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豆哥

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【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-10-27 16:53:19
yingyu06(金币+5): 谢谢：-） 2011-11-03 16:37:09

柱色谱按时间收集的组分也是按相应的苯酚硫酸法测定。
但是多糖溶液的用量不一定非要2ML
如果收集时间间隔短，可能收集不到2ml，可以加蒸馏水到2ml后再测定
如果多于2ml，可以吸取部分加蒸馏水定容或者直接吸取2ml
不过最好还是用示差检测，得到的数据比较稳定

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边学边问，才有学问。

3楼2011-10-27 16:51:58

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yingyu06

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因为没有仪器啊

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4楼2011-10-27 21:58:36

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yingyu06

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引用回帖:

3楼: Originally posted by 豆哥 at 2011-10-27 16:51:58:
柱色谱按时间收集的组分也是按相应的苯酚硫酸法测定。
但是多糖溶液的用量不一定非要2ML
如果收集时间间隔短，可能收集不到2ml，可以加蒸馏水到2ml后再测定
如果多于2ml，可以吸取部分加蒸馏水定容或者直接吸取 ...

还有一个问题，请问在做多糖洗脱曲线的时候一般不是以管数为横坐标，吸光度为纵坐标吗，如果加蒸馏水稀释的话做的是不是就不准确了呢？

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5楼2011-10-27 22:02:23

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