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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 【讨论】大家讨论一下，用苯酚-硫酸法测多糖
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chengjg

木虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】大家讨论一下，用苯酚-硫酸法测多糖 已有15人参与

我想用苯酚-硫酸法测定多糖，以葡糖糖做标曲，可是看了很多资料方法不一，药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下：1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚，摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀，室温放置20min,490nm测吸光值。
     2、取样2ml+1ml 6%重蒸酚摇匀，加入5ml浓硫酸摇匀沸水浴15min，快速冷却，490nm测吸光值。
     3、...
我想问一下有没有一个学术上公认的标准?哪个方法更准确呀？

[ Last edited by lovibond on 2011-8-19 at 08:54 ]
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1楼 2011-03-22 13:13:52
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wsh2454

木虫 (初入文坛)
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955476楼: Originally posted by chengjg at 2011-03-22 13:13:52:
我想用苯酚-硫酸法测定多糖，以葡糖糖做标曲，可是看了很多资料方法不一，药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下：1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚，摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀，室温放置20 ...

想问一下楼主，你的空白加入苯酚硫酸后是什么颜色？我用苯酚硫酸法测多糖，空白有时是粉色，有是橙色，空白应该是什么颜色？还有就是我经过提取后得到粗多糖提取液，然后多糖的测定用的是苯酚硫酸法，做出葡萄糖标准曲线，想问一下样品液在标曲上读出的直接是多糖含量还是总糖的含量，看了好多文献，有的说是多糖含量，有的说是总糖含量还需减去还原糖含量，才得到多糖含量，现在我很疑惑，都不知道测出的是多糖还是总糖，希望您能帮我解答一下，谢谢！
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7楼2012-05-03 10:33:25
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wsh2454

木虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by chenghao6518 at 2013-05-08 16:42:13
我也想问下这个问题：测定的是总糖吗？还有还原糖是哪里减的？...

苯酚硫酸测得是总糖，然后我用DNS测出还原糖，多糖用总糖减去还原糖
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10楼2013-05-09 08:08:57
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普通回帖

tenganguo

木虫 (小有名气)

文书
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junwen6516(金币+1): 感谢交流 2011-03-22 16:24:35
引用回帖:
Originally posted by chengjg at 2011-03-22 13:13:52:
我想用苯酚-硫酸法测定多糖，以葡糖糖做标曲，可是看了很多资料方法不一，药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下：1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚，摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀，室温放置20 ...

一般为第一种，一般该反应需要一定时间，但也不能太长，不然糠醛分解

若能准确控制水浴的反应温度和时间，理论上是最好的
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到此一游
2楼2011-03-22 14:15:48
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chengjg

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tenganguo at 2011-03-22 14:15:48:
一般为第一种，一般该反应需要一定时间，但也不能太长，不然糠醛分解

若能准确控制水浴的反应温度和时间，理论上是最好的

哦 谢谢 还有就是苯酚必须的用重蒸酚吗？
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3楼2011-03-22 22:20:14
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tenganguo

木虫 (小有名气)

文书
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Originally posted by chengjg at 2011-03-22 22:20:14:
哦 谢谢 还有就是苯酚必须的用重蒸酚吗？

重结晶最好，但也有反映说，购买的分析纯就可以
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到此一游
4楼2011-03-25 10:03:07
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)
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lovibond(金币+1): 鼓励交流 2011-03-25 12:01:02
苯酚被氧化以后测定就会出问题，在使用苯酚前可以看看其是否变红，要是变红就是被氧化成苯醌了，一般新买的分析纯苯酚应该没有问题。
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5楼2011-03-25 10:49:06
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chengjg

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by wujia115 at 2011-03-25 10:49:06:
苯酚被氧化以后测定就会出问题，在使用苯酚前可以看看其是否变红，要是变红就是被氧化成苯醌了，一般新买的分析纯苯酚应该没有问题。

哦 明白了 谢谢
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6楼2011-03-25 20:35:47
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jacsun

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问，直接买商品重蒸苯酚行吗，分析纯就可以吗？对生产日期有什么要求，谢谢。
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8楼2012-05-28 21:51:43
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chenghao6518

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by wsh2454 at 2012-05-03 10:33:25
想问一下楼主，你的空白加入苯酚硫酸后是什么颜色？我用苯酚硫酸法测多糖，空白有时是粉色，有是橙色，空白应该是什么颜色？还有就是我经过提取后得到粗多糖提取液，然后多糖的测定用的是苯酚硫酸法，做出葡萄糖标 ...

我也想问下这个问题：测定的是总糖吗？还有还原糖是哪里减的？
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9楼2013-05-08 16:42:13
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