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chengjg

木虫 (正式写手)

[交流] 【讨论】大家讨论一下,用苯酚-硫酸法测多糖已有15人参与

我想用苯酚-硫酸法测定多糖,以葡糖糖做标曲,可是看了很多资料方法不一,药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下:1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚,摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀,室温放置20min,490nm测吸光值。
     2、取样2ml+1ml 6%重蒸酚摇匀,加入5ml浓硫酸摇匀沸水浴15min,快速冷却,490nm测吸光值。
     3、...
我想问一下有没有一个学术上公认的标准?哪个方法更准确呀?

[ Last edited by lovibond on 2011-8-19 at 08:54 ]
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wsh2454

木虫 (初入文坛)


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955476楼: Originally posted by chengjg at 2011-03-22 13:13:52:
我想用苯酚-硫酸法测定多糖,以葡糖糖做标曲,可是看了很多资料方法不一,药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下:1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚,摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀,室温放置20 ...

想问一下楼主,你的空白加入苯酚硫酸后是什么颜色?我用苯酚硫酸法测多糖,空白有时是粉色,有是橙色,空白应该是什么颜色?还有就是我经过提取后得到粗多糖提取液,然后多糖的测定用的是苯酚硫酸法,做出葡萄糖标准曲线,想问一下样品液在标曲上读出的直接是多糖含量还是总糖的含量,看了好多文献,有的说是多糖含量,有的说是总糖含量还需减去还原糖含量,才得到多糖含量,现在我很疑惑,都不知道测出的是多糖还是总糖,希望您能帮我解答一下,谢谢!
7楼2012-05-03 10:33:25
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wsh2454

木虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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9楼: Originally posted by chenghao6518 at 2013-05-08 16:42:13
我也想问下这个问题:测定的是总糖吗?还有还原糖是哪里减的?...

苯酚硫酸测得是总糖,然后我用DNS测出还原糖,多糖用总糖减去还原糖
10楼2013-05-09 08:08:57
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tenganguo

木虫 (小有名气)

文书

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junwen6516(金币+1): 感谢交流 2011-03-22 16:24:35
引用回帖:
Originally posted by chengjg at 2011-03-22 13:13:52:
我想用苯酚-硫酸法测定多糖,以葡糖糖做标曲,可是看了很多资料方法不一,药品用的都大约是6%重蒸酚、浓硫酸。可是在实验操作上有出入。
有如下:1、取样2ml+1ml 6%重蒸酚,摇匀再加入5ml浓硫酸摇匀,室温放置20 ...

一般为第一种,一般该反应需要一定时间,但也不能太长,不然糠醛分解

若能准确控制水浴的反应温度和时间,理论上是最好的
到此一游
2楼2011-03-22 14:15:48
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chengjg

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by tenganguo at 2011-03-22 14:15:48:
一般为第一种,一般该反应需要一定时间,但也不能太长,不然糠醛分解

若能准确控制水浴的反应温度和时间,理论上是最好的

哦 谢谢 还有就是苯酚必须的用重蒸酚吗?
3楼2011-03-22 22:20:14
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tenganguo

木虫 (小有名气)

文书


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
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Originally posted by chengjg at 2011-03-22 22:20:14:
哦 谢谢 还有就是苯酚必须的用重蒸酚吗?

重结晶最好,但也有反映说,购买的分析纯就可以
到此一游
4楼2011-03-25 10:03:07
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
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lovibond(金币+1): 鼓励交流 2011-03-25 12:01:02
苯酚被氧化以后测定就会出问题,在使用苯酚前可以看看其是否变红,要是变红就是被氧化成苯醌了,一般新买的分析纯苯酚应该没有问题。
5楼2011-03-25 10:49:06
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chengjg

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wujia115 at 2011-03-25 10:49:06:
苯酚被氧化以后测定就会出问题,在使用苯酚前可以看看其是否变红,要是变红就是被氧化成苯醌了,一般新买的分析纯苯酚应该没有问题。

哦 明白了 谢谢
6楼2011-03-25 20:35:47
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jacsun

铜虫 (小有名气)


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请问,直接买商品重蒸苯酚行吗,分析纯就可以吗?对生产日期有什么要求,谢谢。
8楼2012-05-28 21:51:43
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chenghao6518

新虫 (初入文坛)


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7楼: Originally posted by wsh2454 at 2012-05-03 10:33:25
想问一下楼主,你的空白加入苯酚硫酸后是什么颜色?我用苯酚硫酸法测多糖,空白有时是粉色,有是橙色,空白应该是什么颜色?还有就是我经过提取后得到粗多糖提取液,然后多糖的测定用的是苯酚硫酸法,做出葡萄糖标 ...

我也想问下这个问题:测定的是总糖吗?还有还原糖是哪里减的?
9楼2013-05-08 16:42:13
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