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苯酚硫酸法葡萄糖的标准曲线
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大家好，我使用以下方法做的标准曲线，但测出来的曲线变化太大，重复操作时，同样浓度的吸光度能从0.2变到0.6.请问大家有没有做好的曲线让我参考一下哦，谢谢啦！ 准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 [ Last edited by lovibond on 2011-6-28 at 12:35 ] |
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【答案】应助回帖
hunxibaba(金币+1): 2011-05-13 14:15:09
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这是我的标曲： 滴加葡萄糖标准溶液量：0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18 0.2 对应吸光值：0.204 0.29 0.392 0.461 0.522 0.63 0.655 0.816 0.799 0.889 y = 3.7994x + 0.1479 R2 = 0.9851 系数不是很理想，但如果去掉后面几个点能到0.994，将就看下吧 另外做这个标曲我发现过这么几个问题： 1.苯酚要现用现配，最好要重蒸 2.有时发现连葡标都要重配，过段时间测发现变动很大，个人分析认为可能是瓶子中有微生物利用了葡萄糖导致含量下降 3.滴加各种溶液时要准确，不然会导致一些波动，影响相关系数 4.最好用一个比色皿去比色，减少误差。 |
2楼2011-05-05 20:32:36
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