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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 苯酚硫酸法葡萄糖的标准曲线
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hunxibaba

金虫 (初入文坛)

[求助] 苯酚硫酸法葡萄糖的标准曲线

大家好，我使用以下方法做的标准曲线，但测出来的曲线变化太大，重复操作时，同样浓度的吸光度能从0.2变到0.6.请问大家有没有做好的曲线让我参考一下哦，谢谢啦！
准确称取标准葡聚糖（或葡萄糖）20mg于500ml容量瓶中，加水至刻度，分别吸取0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6及1.8ml,各以蒸馏水补至2.0ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。

[ Last edited by lovibond on 2011-6-28 at 12:35 ]
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1楼 2011-05-03 21:38:59
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kwzhl

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

hunxibaba(金币+1): 2011-05-13 14:15:09
这是我的标曲：

滴加葡萄糖标准溶液量：0.02        0.04        0.06        0.08        0.1        0.12        0.14        0.16        0.18        0.2
对应吸光值：0.204        0.29        0.392        0.461        0.522        0.63        0.655        0.816        0.799        0.889
y = 3.7994x + 0.1479
R2 = 0.9851

系数不是很理想，但如果去掉后面几个点能到0.994，将就看下吧

另外做这个标曲我发现过这么几个问题：
1.苯酚要现用现配，最好要重蒸
2.有时发现连葡标都要重配，过段时间测发现变动很大，个人分析认为可能是瓶子中有微生物利用了葡萄糖导致含量下降
3.滴加各种溶液时要准确，不然会导致一些波动，影响相关系数
4.最好用一个比色皿去比色，减少误差。
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我心原太愚,我语本无意.解我语者为我友,晓我意者是知音
2楼2011-05-05 20:32:36
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kwzhl

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
小损样儿(金币+2): 鼓励新虫耐心细致的回答，欢迎常来食品版块交流。 2011-05-05 20:42:51
引用回帖:
Originally posted by kwzhl at 2011-05-05 20:32:36:
这是我的标曲：

滴加葡萄糖标准溶液量：0.02        0.04        0.06        0.08        0.1        0.12        0.14        0.16        0.18        0.2
对应吸光值：0.204        0.29        0.392        0.461        0.522        0.63        0.655        0.816        0.799        0.889
y = 3.7994x + 0.1479
R2 = 0.9851

...

打错了，第一排应该是葡萄糖的含量，换做滴家标准液体积应该都除以0.1
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我心原太愚,我语本无意.解我语者为我友,晓我意者是知音
3楼2011-05-05 20:36:56
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飔瑜

金虫 (初入文坛)
★ ★
树树8013(金币+2): 谢谢对本求助帖的关注，欢迎常来。 2011-06-14 20:48:11
0.0         0.2         0.4         0.6         0.8         1.0
0.000         0.195         0.395         0.625         0.821         0.991
y=1.009x  (R2=0.9986)
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相信自己，依靠自己
4楼2011-06-14 16:01:42
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飔瑜

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 飔瑜 at 2011-06-14 16:01:42:
0.0         0.2         0.4         0.6         0.8         1.0
0.000         0.195         0.395         0.625         0.821         0.991
y=1.009x  (R2=0.9986)

第一排中对应的葡萄糖含量为0.00mg  0.02mg  0.04mg 0.06mg 0.08mg 0.10mg
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相信自己，依靠自己
5楼2011-06-14 16:09:06
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