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hq1219

银虫 (小有名气)

[求助] 正相柱检测不出峰的问题 已有6人参与

我最近在做硅胶柱检测含量,因是第一次接触,所以有些地方不懂,还请大家帮忙分析。该条件用的是正相柱,但是用的是反相条件:乙腈-甲醇-磷酸溶液,走梯度,结果老是不出峰 (  正常情况应该是8.4min出峰的)
流动相梯度:0-4min     乙腈-甲醇-0.5%磷酸=90:8:2
                     4-12min   乙腈-甲醇-0.5%磷酸=60:35:5
                      12-16min  乙腈-甲醇-0.5%磷酸=90:8:2
正相柱检测不出峰的问题
空白.png


正相柱检测不出峰的问题-1
样品.png
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hq1219

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 河边的芦苇 at 2013-07-01 14:25:48
请问是有具体要求么,为什么用正向柱,用反向的流动相呢??

因为该主药有多个同分异构体,用反相的流动相出峰很多,我们的主要目的是把这些峰集中成一个峰,所以就是正相柱子检测了
4楼2013-07-01 15:46:11
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河边的芦苇

至尊木虫 (著名写手)

哈氏鹅

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问是有具体要求么,为什么用正向柱,用反向的流动相呢??
静于心,睿于智
2楼2013-07-01 14:25:48
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fengzi913

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hq1219(zhychen2008代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2013-07-01 22:27:32
正相柱一般都不用水的。都是异丙醇:环己烷调极性即可
3楼2013-07-01 14:34:47
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lzx0018love

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hq1219(zhychen2008代发): 金币+3, 多谢回帖交流 2013-07-01 22:28:11
你可真是心大!!正相柱跑反相?流动相你就有问题!!你再回去看看柱子的分离原理比较好,正相一般都为吸附色谱,用无水溶剂较多,也可以用水但是这是分配色谱!!
一切都会好的!!
5楼2013-07-01 16:07:07
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