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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 液相检测 做不了几天柱子就不行了？怎么回事？？
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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

[交流] 液相检测 做不了几天柱子就不行了？怎么回事？？

柱效为何不高
本人用安捷伦TC-C18做杀虫单，做不了几天柱子就不行了，流动相为4.8g的磷酸二氢钾溶于1000ml水中。不知什么原因，请各位帮忙回答。做完后也用10%的甲醇水冲了半小时，然后用纯甲醇0.5的流速冲至过夜。
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1楼 2011-12-18 17:17:49
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妞妞1087

新虫 (小有名气)
★ ★
laoyisng1122(金币+1):谢谢参与
leecius(金币+1): 谢谢发帖。 2011-12-18 18:05:18
先用纯水冲
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2楼2011-12-18 17:41:07
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tsunamimiao

金虫 (小有名气)
★ ★
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xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-18 19:59:39
也有可能是带入杂质引起，可以加上预柱试试
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3楼2011-12-18 18:41:05
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Michaeldu

木虫 (正式写手)
★ ★
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jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-19 12:17:16
管道中是否有气泡没排净，或者药品中有杂质，或者用各个梯度的甲醇冲一下，洗洗柱！
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4楼2011-12-18 21:54:43
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笨笨的宝贝

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-12-19 12:17:23
不知你的柱长是多少，通常需要用10%甲醇冲洗柱体积的3倍左右，也可柱长的2.5-3倍，你的半个小时能够把盐冲干净吗，你的缓冲盐的浓度还不小呢....若真想冲过夜的话，可以考虑用10%的甲醇冲过夜，第二天可以直接换流动相...
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5楼2011-12-19 12:05:41
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masai100

木虫 (正式写手)
★ ★
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leecius(金币+1): 谢谢。 2011-12-19 12:51:59
楼主把柱子坏在哪一方面说清楚点，如果主要升高，或者分离度下降，应该是你的磷酸二氢钾加多了，20倍柱体积纯水冲洗，因为磷酸二氢钾不溶于甲醇，会在柱子中析出。建议你磷酸二氢钾量少一些，或者换一种缓冲盐，例如甲酸盐或者乙酸盐试试。
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6楼2011-12-19 12:49:15
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xiaodou_xl

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
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karl2100(金币+1): 3Q 2011-12-20 00:02:28
可以用甲醇：水=90:10的溶液多冲洗吧，要是还不行的话可以试试用稀硝酸冲冲，但是时间不要太长，试试看有没有缓解吧
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7楼2011-12-19 21:05:14
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valine

金虫 (正式写手)
★ ★
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豆哥(金币+1): 感谢参与讨论！！！ 2011-12-20 09:43:56
1、磷酸二氢钾会在柱子里析出的，你的浓度太高了，我看到的一般在2－3g/L
2、磷酸盐一般先用大量的水冲柱子，比如先流动相（防止柱压过载，可逐渐调高水的比例，维持纯水冲洗1h），再甲醇0.5h，仅供参考
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8楼2011-12-20 09:09:26
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wangxiang88

新虫 (正式写手)
★ ★
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xiaoxiao270(金币+1): 谢谢 2011-12-20 12:38:08
可能是有杂质析出
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9楼2011-12-20 11:36:29
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frh-19850621

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你的柱子是怎么个不行了？是柱压高呢还是峰形峰位出问题了？
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10楼2011-12-20 15:01:45
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xingyuan99

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可能有几个原因：
1、流动相盐析出
2、你的样品不干净堵柱子或是在柱子中析出
可以用10%的甲醇多冲下柱子，要是样品太脏的话，建议你还是加个预柱吧，毕竟预柱比柱子要便宜多了..
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11楼2011-12-20 15:58:46
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