| 查看: 2099 | 回复: 15 | ||
[求助]
液相测定样品过程中出峰发现问题了？怎么解决？
|
|
这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗！？？ 小弟做的实验主要是测酶活和抑制剂对酶的抑制效果，流动相：0.8%乙腈，20mM三乙胺，用醋酸调PH到6.0，波长259nm。 第一天测的样品很正常，几个峰都能分开，产物出峰时间在6.3min左右。  但是第二天，在酶反应体系中加入了极少量的DMSO后，就在3.3min左右出现了一个非常大的峰，很怪异！我测过，DMSO在259nm波长处基本上是无吸收的，我重复了很多次，这个峰一直都出现。  这个突然出现的大峰是溶剂峰吗，为什么会这么的大，这个峰的出现导致我的检测的结果很不准确，产物出的峰都成山丘一样凸起来的了，根本就不是尖的，大伙帮我看看是怎么回事吧。 |
回复此楼» 猜你喜欢
参与限项
已经有5人回复
-
推荐一本书
已经有7人回复
-
有没有人能给点建议
已经有5人回复
-
假如你的研究生提出不合理要求
已经有12人回复
-
全日制（定向）博士
已经有5人回复
-
萌生出自己或许不适合搞科研的想法，现在跑or等等看？
已经有4人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有4人回复
-
对氯苯硼酸纯化
已经有3人回复
-
所感
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 液相色谱检测 出峰遇到问题了。怎么办？？
已经有12人回复
- 液相仪器测试物质 出峰发现问题了？？
已经有11人回复
- 液相样品检测 发现出峰问题，谢谢了。
已经有5人回复
- 液相样品检测 出峰遇到问题了？怎么办才好？？
已经有21人回复
- 液相检测物质 出峰发现问题了。怎么解决？？
已经有3人回复
- 液相检测样品 出峰问题？请教大家！！
已经有6人回复
- 液相测试样品出峰遇到问题了。不知道怎么解决？？
已经有6人回复
- 液相 分析样品过程中 出峰发现问题了。怎么办才好？
已经有3人回复
- 液相检测样品出峰发现问题？怎么解决？？
已经有3人回复
- 【求助】液相测定样品 出峰问题，谢谢！！
已经有4人回复
- 【求助】液相测定样品出峰问题？
已经有3人回复
- 【求助】液相样品测定 梯度洗脱相关问题？？
已经有5人回复
- 【求助】液相样品测定出现问题了？求助大家！
已经有3人回复
- 【求助】液相测试出峰发现问题了？
已经有8人回复
- 【求助】液相测定物质出峰发现问题了？？
已经有4人回复
- 【求助】请教：液相 检测样品问题？
已经有4人回复
- 【求助】药物在液相中的峰面积和检出限均出现问题，该怎么办，大家帮忙分析一下
已经有6人回复
2楼2011-05-26 17:57:32
zgf340631735
至尊木虫 (文坛精英)
- 应助: 36 (小学生)
- 贵宾: 0.1
- 金币: 39244.6
- 红花: 14
- 沙发: 133
- 帖子: 23668
- 在线: 481.7小时
- 虫号: 985556
- 注册: 2010-03-30
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
3楼2011-05-26 21:03:24
4楼2011-05-27 00:32:30
|
这个实验师兄以前做过了的，DMSO加入后不会出现那个奇怪的峰，而且DMSO也不会参与这个反应啊，我是重复师兄以前做过的实验，流动相和体系都是按照师兄的来的，我在想这个会不会因为我的流动相里面的有机相含量太低，水分含量太高，结果把柱子里面的填料给冲出来了啊？ C18的柱子流动相里面的水的含量最低能是多少啊？ 我这个反应体系确实是图一中峰1、2是酶反应底物，1+2---->峰3，但是反应10分钟后，我用沸水煮了10分钟，使酶失活终止反应了，所以按道理，这个反应不能继续进行了。 关于图2，为什么加DMSO,是因为我要加入酶抑制剂，看抑制剂的抑制效果，而那些小分子抑制剂都是溶解在DMSO里面的，加入DMSO或者抑制剂后，这个大峰就出现了。 这个问题我一直不知道是为什么，因为我换柱子后，这个大峰就消失了，我只能认为是柱子的原因，因为我用的是伊力特C18的柱子，这个柱子的流动相里面有机相含量最好是不能少于10%的，而我的流动相里面的有机相几乎为0，因为加入有机相后几个峰会连在一起而分不开，所以只能减少有机相的含量，现在用的是安捷伦TC-C18(2)的柱子，流动相里面加入了5%的甲醇，虽然能做出来，但是重复性不是很好，我这个星期实验了再和大家交流下啊。 |
5楼2011-05-27 17:37:57
6楼2011-05-29 20:45:01
7楼2011-05-29 21:12:08
8楼2011-05-30 13:28:31
9楼2011-05-30 21:42:04
你是不是全波长扫描啊，如果是，你看一下215nm波长下，3.3min处得那个峰是不是很宽的那种峰，如果是的话应该就是DMSO了 10楼2011-05-31 21:29:01