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yzhlasiI

铁虫 (正式写手)

[求助] 液相测定样品过程中出峰发现问题了?怎么解决?

这个超大的峰难道是传说中的溶剂峰或鬼峰吗!??

小弟做的实验主要是测酶活和抑制剂对酶的抑制效果,流动相:0.8%乙腈,20mM三乙胺,用醋酸调PH到6.0,波长259nm。

第一天测的样品很正常,几个峰都能分开,产物出峰时间在6.3min左右。



但是第二天,在酶反应体系中加入了极少量的DMSO后,就在3.3min左右出现了一个非常大的峰,很怪异!我测过,DMSO在259nm波长处基本上是无吸收的,我重复了很多次,这个峰一直都出现。



这个突然出现的大峰是溶剂峰吗,为什么会这么的大,这个峰的出现导致我的检测的结果很不准确,产物出的峰都成山丘一样凸起来的了,根本就不是尖的,大伙帮我看看是怎么回事吧。
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qwert9893

银虫 (小有名气)

你可以进一针空白溶剂,看看是不是溶剂峰;如是,继续往下看

稀释进样前的溶液时,用你流动相的比例(仅有机相和水相的比例即可,其他的不必加入),可能是进样量过大引起。
你试试看
9楼2011-05-30 21:42:04
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lunan213

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-05-30 21:16:54
首先这个峰肯定不是溶剂峰,估计是以前残留的杂质没冲洗干净,建议多冲洗点时间,然后再进样
2楼2011-05-26 17:57:32
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

yzhlasiI(金币+1): 非常感谢! 2011-05-27 17:37:20
系统提前一定要平衡好
会不会是DMSO和样品反应了之后产生的杂质?!
样品是不是新配的?有没有发现你第一张那几个峰在第二张图上都变小了!!
别加DMSO第二天,再进一下酶反应体系,看看有没有那个峰。
学无止境
3楼2011-05-26 21:03:24
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主加入DMSO的目的是什么啊?
4楼2011-05-27 00:32:30
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