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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » GST纯化，洗脱时不出峰，检测有蛋白。
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aofeng860308

木虫 (正式写手)

[求助] GST纯化，洗脱时不出峰，检测有蛋白。 已有3人参与

如题，纯化一个带GST标签的蛋白，裂解Buffer和平衡Buffer为PBS+5%Triton x-100，洗脱Buffer为50mM Tris-Hcl+10mM 还原型谷胱甘肽。洗脱时，不但不出峰，峰值反倒出现负值，而且负得很多，-2000mAU左右。将收集的样品进行SDS-PAGE，发现洗脱中有目的蛋白，只是量不多。
想请教一下大神们，为什么会不出峰，反而会出现负值，之前纯化过的都是正常的。
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1楼 2014-06-17 13:41:55
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Davie_Meagen at 2014-06-17 15:57:47
纯属意外，检测器里可能有气泡导致的，很正常。

不是气泡，最近做了几次都是出现这样。
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3楼2014-06-17 16:59:57
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