24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5832  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

一路向前看

铁虫 (初入文坛)

[交流] western blot出现多条带是什么原因

一抗是兔多抗,稀释度1:800;二抗1:3000,上样大约40ug,TBST洗膜3*10min,结果如图出现明显三条带(大约110、100、85KD),另外还有些微弱的条带,这个蛋白目前没人做过,预测的分子量是63kd,实际分子量未见报道,请问这是什么原因造成的?是蛋白量太大?抗体浓度太高?应该选用哪一条带?求高手解答

western blot出现多条带是什么原因
~ZDNZPNNBPX)O~X@NR}$1}C.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
分子量最接近的那条带可能性最大,有时候多克隆抗体的杂带还是很明显滴
5楼2014-06-11 12:23:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

Rubisco580

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多抗特异性差,是可能出杂带的。一般主带比杂带深,但我也碰到过杂带深的……
上样量不算很大,我常用50ug。
可以试试一抗再稀一些或者用封闭用的牛奶来配,据说这样会减少杂带。
对你的实验不了解,用哪条带还得楼主自己多加分析
4楼2014-06-11 11:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shilei916511

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能是蛋白变性不彻底,建议煮蛋白时间长点,另外感觉胶也有些问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我懂我的偏执,默不作声或冷漠是我最大的容忍。
6楼2014-06-13 17:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可能原因:
1.封闭不好。5%脱脂奶粉或者3%BSA或质量不好,或者用量不足,或者时间不够等。
2.一抗的浓度过大,引起抗体与非抗体的特异性识别的抗原也发生了一定程度上的相互作用,这时洗膜是洗不下去的。
3.抗体质量不高。至少一抗应该用单克隆抗体,其识别的抗原免疫簇位点不是唯一的。而一抗若为多克隆抗体,则是是一群抗体的组合,因为多克隆抗体的识别的抗原免疫簇位点不是唯一的,一抗可能与非目的抗原也会存在抗原识别。
8楼2014-07-07 23:29:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 349求调剂 +5 李木子啊哈哈 2026-03-25 5/250 2026-03-29 10:22 by 唐沐儿
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +8 谷雨上岸 2026-03-23 9/450 2026-03-29 01:00 by 我是小康
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 一志愿华北电力大学能动专硕,293,求调剂 +3 15537177284 2026-03-23 5/250 2026-03-28 16:11 by xxxsssccc
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +3 萝卜炖青菜 2026-03-28 3/150 2026-03-28 14:11 by 唐沐儿
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +4 Zuhui0306 2026-03-25 4/200 2026-03-28 13:07 by 唐沐儿
[考研] 070300求调剂306分 +4 26要上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-28 13:06 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
请填处理意见