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艰苦温度

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
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帖子: 79
在线: 17.8小时
虫号: 2795644
注册: 2013-11-12
专业: 人类遗传学

[求助] 7kb质粒定点突变PCR检测无产物还要继续做下去吗已有3人参与

环化PCR定点突变质粒，大小为7kb的质粒，设计的引物28bp，引物GC含量为65%，质粒GC含量为53%，PCR扩增分别设置了25个循环和30个循环都做过，总共50ul体系，取5ul进行检测，结果都看不到目的条带，还需要往后用Dpn1处理吗？

这个PCR过程耗时好长的说，试过几次了，都没目的条带，要崩溃了……
……求各位有经验的前辈指点迷津啊！

万谢！

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PCR疑难解答

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1楼2014-06-06 23:49:04

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grase

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专业: 基因表达调控与表观遗传学

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1

引物再设计长一些就OK了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

3楼2014-06-07 08:36:58

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