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[求助]
求助：原来可以纯化出来的蛋白现在纯化不出来了！ 已有1人参与
本人之前构建了原核表达载体--pET30a，转入BL21后诱导原核表达，设置了0-6小时的诱导时间，可以明显看到从第二小时开始有目的带出现。但是，问题出现了，我最近又开始重新诱导这个蛋白，条件和之前都是一样的，我诱导不出来了！
本来认为是菌放的时间长了，活力降低，所以我就重新转化了BL21，但是经过诱导之后依然发现没有目的带。现在十分费解。有没有大神也遇到了这样的情况，请问是怎么解决的？谢谢大家了！ |
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