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弦上的梦99金虫 (小有名气)
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[求助]
酶活测定基本问题 已有1人参与
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大神们好！！（1）我想在靶标酶水平上测定一种除草剂对杂草的活性。虽然还没有用整株生测法来确定敏感与抗性，但是我提前已经知道了哪个种群是敏感的，哪个种群是抗的（因为我开始实验之前老师已经筛选过几次了），请问我可不可以先直接用这两个种群为材料才测定酶活？还是要等喷药过后再以这两个种群为材料来测定呢？因为我想的是，如果在喷药之前直接测的话，会不会因为没有喷药而导致靶标酶活性没有变化呢？靶标酶活性的变化需不需要喷药后的除草剂来诱导啊？？请指教！！！ （2）另外，抗性种群中代谢酶活性增强是不是也要除草剂来诱导呢？  还是没有喷除草剂的情况下，抗性种群中的代谢酶活性本来就很强？？ |
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【答案】应助回帖
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木虫/panda: 金币+3, 感谢应助，欢迎常来农林版 2014-05-29 22:52:34
木虫/panda: 金币+3, 感谢应助，欢迎常来农林版 2014-05-29 22:52:34
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第一个问题，既然知道了敏感和抗性了，可以直接测定二者靶标酶的米氏方程，km和vmax，比较酶促动力学参数，看看有没有差异（这个差异不好说，看你是什么靶标了，这个酶是不是至关重要的。个人感觉差异应该不会太大，因为没有药物诱导）。所以还是低剂量处理几天再测定吧。 第二个问题依然和酶有关系，可能是增强的，也可能没有差异。一切要看你的靶标酶。 个人认为（不一定对），如果是基因变化引起的可遗传抗性，靶标酶不用诱导直接测定就能看出差异； 但如果是你的抗性机理不是基因变化，而且其他的，可能不诱导就看不出差异。 还有生物体的每个酶都需要能量来合成，除了维持生命至关重要的酶需要经常合成，其他不重要的酶是随用随合成的，也就是说有胁迫了才能表达。 |
2楼2014-05-29 21:56:17
弦上的梦99
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3楼2014-05-30 14:19:51
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