应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 地学 » 土壤学 » 【求助】土壤脲酶活性测定中的问题
481/5返回列表12345下一页
查看: 7222  |  回复: 47
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wangxuanxuan

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】土壤脲酶活性测定中的问题 已有38人参与

我现在测土壤中的脲酶活性，用的是比色法。结果发现无土对照的数值很大，不清楚是什么原因。请哪位做过这方面的给解释下，谢谢。
试验步骤：试剂：1）甲苯
2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。
3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释至1000毫升。
4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A），存于冰箱中；27克NaOH溶于100毫升水（B）。将AB溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。
5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的标准液
标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液20ml，定容至100ml，即稀释了5倍，吸取1，3，5，7，9，11，13ml移至50ml容量瓶，加水至20ml，再加入4ml苯酚钠，仔细混合，加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟,用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。
1) 称取5g过1mm筛的风干土样于50ml容量瓶中。
2) 向容量瓶中加入1ml甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟
3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml柠檬酸缓冲液（PH6.7），并 仔细混合
4) 将容量瓶放入38摄氏度恒温箱中，培养3h
5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。
6) 显色：吸取1ml滤液于50ml容量瓶中，加入10ml蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml苯酚钠，仔细混合，再加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现（青定）酚的蓝色。
7) 1h内在（（青定）酚的蓝色在1h内保持稳定）在分光光度计上用1cm液槽，于578nm处将显色液进行比色测定。
8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照
9)无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。

结果计算：土壤脲酶活性以24小时后100g土壤中NH3－N的毫克数表示。
M＝（X样品－X无土－X无基质）*100*10
式中：M－土壤脲酶活性值
X样品――样品实验的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
X无土――无土对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
X无基质――无基质对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数
100 ――样品定容的体积与测定时吸取量的比值
10 ――酶活性单位的土重与样品土重之比值

[ Last edited by wangxuanxuan on 2010-3-21 at 21:24 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤固碳科学 土壤类实验方法与技巧 不明白

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
自强不息、厚德载物。
1楼 2010-03-21 21:22:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhwh70

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
脲酶的测定中次氯酸钠的作用是什么？因为购买的次氯酸钠溶液中氯的浓度不是确定的，如何保证氯的浓度是0.9%
赞一下(6人) 回复此楼
11楼2012-02-10 15:05:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxfjdxh

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
LZ你好，我做实验曾经遇到过几乎一模一样的问题。后来经过改进，结果便好了。
主要原因：培养时间太短，稀释倍数太大。
1、培养3h是远远不够的，要培养24h。
2、培养结束后，不要加水到刻度线，直接过滤提取1ml就行了。
3、我做的是亚热带常绿阔叶林的土壤，标准曲线的浓度设定得很好，结果基本都在曲线的浓度之内。
赞一下(6人) 回复此楼
22楼2012-12-03 11:22:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gzbxhx_050

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
无土对照如果颜色较深，那就基质产生的颜色，应该是基质中铵态氮含量较高，可能是脲自行分解了，要同时做无土和无基质对照。
赞一下(4人) 回复此楼
8楼2011-09-17 21:00:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张四伟

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
”无基质对照“中的基质是指什么？
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2011-09-05 12:19:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuh517

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 张四伟 at 2011-08-31 20:53:19:
测定脲酶到底有什么意义？我也是作物栽培与耕作学的。谢谢！

不加作为基质的物质，例如脲酶就是不加尿素，其他一样。
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-10-31 14:04:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Crazy灬狐

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by mumud at 2011-06-06 16:14:32
我也做这个试验呢，试验方法上是没有问题的。就是测定标准曲线的时候，不能完全依照那个梯度

那该怎么测定标准曲线啊，求教啊
赞一下(1人) 回复此楼
26楼2013-07-04 18:10:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江之穗

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那这个 不需要再除以土壤干重吗？这个10是酶活性单位和样品土重之比值，不是应该100比5，应该为20吗？
赞一下(1人) 回复此楼
36楼2015-01-07 19:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

jannet0301

木虫 (小有名气)

ds
恩恩 我也是的 求教
赞一下 回复此楼
人生人不爱我我自爱
2楼2011-04-18 18:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mumud

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也做这个试验呢，试验方法上是没有问题的。就是测定标准曲线的时候，不能完全依照那个梯度
赞一下(1人) 回复此楼
每一刻都是意外，不如意的才是常态，顺利才是例外
3楼2011-06-06 16:14:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mumud

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
一个博士师兄给我的建议是，不用那个对照，我也不知道这样是否可以
赞一下(1人) 回复此楼
每一刻都是意外，不如意的才是常态，顺利才是例外
4楼2011-06-06 16:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangming07

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
正想要做脲酶测定！
赞一下(1人) 回复此楼
学海无涯，勤做舟！
5楼2011-06-08 10:30:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张四伟

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
测定脲酶到底有什么意义？我也是作物栽培与耕作学的。谢谢！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-08-31 20:53:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dengyihan

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
分光光度计用 可见分光光度计 行吗？
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2011-12-29 21:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangxuanxuan 的主题更新
481/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +5 幸运哩哩 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:49 by ChemPharm
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 能源材料化学课题组招收硕士研究生8-10名 +5 脱颖而出 2026-03-16 17/850 2026-03-22 15:18 by 脱颖而出
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +6 2117205181 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:59 by allen-yin
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 286求调剂 +10 Faune 2026-03-21 10/500 2026-03-21 23:34 by 314126402
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭