| 查看: 7225 | 回复: 47 | ||||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||||
wangxuanxuan铁杆木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助】土壤脲酶活性测定中的问题 已有38人参与
|
|||||
|
我现在测土壤中的脲酶活性，用的是比色法。结果发现无土对照的数值很大，不清楚是什么原因。请哪位做过这方面的给解释下，谢谢。 试验步骤：试剂：1）甲苯 2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。 3）柠檬酸盐缓冲液（PH6.7）：184克柠檬酸和147.5克氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释至1000毫升。 4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5克苯酚溶于少量乙醇，加2毫升甲醇和18.5毫升丙酮，用乙醇稀释至100毫升（A），存于冰箱中；27克NaOH溶于100毫升水（B）。将AB溶液保存在冰箱中。使用前将2溶液各20毫升混合，用蒸馏水稀释至100毫升。 5）次氯酸钠溶液：用水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。 6）氮的标准溶液：a 精确称取0.4717克硫酸铵溶于水并稀释至1000ml，得到1ml含有0.1mg氮的标准液 标准曲线绘制：吸取配置好的氮溶液20ml，定容至100ml，即稀释了5倍，吸取1，3，5，7，9，11，13ml移至50ml容量瓶，加水至20ml，再加入4ml苯酚钠，仔细混合，加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟,用水稀释至刻度。将着色液在紫外分光光度计上于578nm处进行比色测定，以标准溶液浓度为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制曲线图。 1) 称取5g过1mm筛的风干土样于50ml容量瓶中。 2) 向容量瓶中加入1ml甲苯（以能全部使土样湿润为度）并放置15分钟 3) 之后加入10ml 10％尿素溶液和20ml柠檬酸缓冲液（PH6.7），并 仔细混合 4) 将容量瓶放入38摄氏度恒温箱中，培养3h 5) 培养结束后，用热至38摄氏度水稀释至刻度，仔细摇荡，并将悬液用致密滤纸过滤于三角瓶中。 6) 显色：吸取1ml滤液于50ml容量瓶中，加入10ml蒸馏水，充分震荡，然后加入4ml苯酚钠，仔细混合，再加入3ml次氯酸钠，充分摇荡，放置20分钟，用水稀释至刻度，溶液呈现（青定）酚的蓝色。 7) 1h内在（（青定）酚的蓝色在1h内保持稳定）在分光光度计上用1cm液槽，于578nm处将显色液进行比色测定。 8) 无土对照：不加土样，其他操作与样品实验相同。以检验试剂纯度，整个实验设置一个对照 9)无基质对照：以等体积的水代替基质，其他操作与样品实验相同。每个土样都设此对照。 结果计算：土壤脲酶活性以24小时后100g土壤中NH3－N的毫克数表示。 M＝（X样品－X无土－X无基质）*100*10 式中：M－土壤脲酶活性值 X样品――样品实验的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数 X无土――无土对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数 X无基质――无基质对照实验中的光密度值在标准曲线上对应的NH3－N毫克数 100 ――样品定容的体积与测定时吸取量的比值 10 ――酶活性单位的土重与样品土重之比值 [ Last edited by wangxuanxuan on 2010-3-21 at 21:24 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 土壤固碳科学 | 土壤类实验方法与技巧 | 不明白 |
» 猜你喜欢
无法从这份源码判断项目是否“获资助批准”
已经有11人回复
-
地球化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有115人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题
已经有9人回复
- 求：KMnO4氧化法测定土壤中的活性有机质的详细方法
已经有13人回复
- 关于土壤氨氮与硝氮测定的问题
已经有5人回复
- 元素分析仪测定土壤全氮和全碳的问题
已经有6人回复
- 【求助】求助关于土壤蛋白酶和蔗糖酶测定所遇到的问题
已经有14人回复
- 【讨论】测土壤酶的虫子们进来交流交流经验吧
已经有26人回复
- 【讨论】测土壤酶活性时土壤湿度的问题
已经有11人回复
- 【求助】土壤中Mo的测定
已经有11人回复
- 【求助/交流】土壤脲酶测定
已经有4人回复
- 【求助】土壤酶多酚氧化酶活性等的具体测定方法
已经有12人回复
liuh517
木虫 (著名写手)
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 4102.3
- 红花: 1
- 帖子: 1981
- 在线: 97.1小时
- 虫号: 1465728
- 注册: 2011-10-28
- 专业: 污染生态化学
9楼2011-10-31 14:04:46
jannet0301
木虫 (小有名气)
ds
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1946
- 帖子: 68
- 在线: 28.4小时
- 虫号: 1117915
- 注册: 2010-10-09
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
2楼2011-04-18 18:31:39
3楼2011-06-06 16:14:32
4楼2011-06-06 16:16:34
40