应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题
101/1返回列表
查看: 6010  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lovezy530520

木虫 (正式写手)

[求助] p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题

用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导，是我的方法不对吗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-06 15:11:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们只用tris缓冲液 ，好像。
赞一下 回复此楼
想要走得快，就单独上路；想要走得远，就结伴同行！！
2楼2012-02-16 15:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-18 10:15:03
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导，是我的方法不对吗？




回答：你的方法有严重问题。

1.p-NP该底物的吸收光谱受溶液中的pH影响极大！
碱性时其吸收最大，而且稳定。
你做p-NP的标准曲线时，应该用Na2CO3 溶液（例如0.5 M）的。
而不是用Tris-HCl或其他溶液。

2.你在实际测定时，反应完后，你的反应液应该用Na2CO3 溶液（例如 1M）与反应液同体积混合，一方面是为了产物的稳定，另一方面是终止了反应。
赞一下(4人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2012-02-17 11:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovezy530520

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HarveyWang at 2012-02-17 11:52:06:
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导 ...

你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~
赞一下 回复此楼
4楼2012-02-17 16:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
4楼: Originally posted by lovezy530520 at 2012-02-17 16:56:10:
你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~

好好看看上面我说的内容！
不想再重复第二遍。
赞一下(1人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2012-02-17 17:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

崛起11

铁虫 (初入文坛)
我在用p-NPP法测脂肪酶活性时，做对硝基苯酚标准曲线时用的是乙腈作溶剂，配制了0.1mol/L的溶液，稀释至1mmol/L，用紫外分光光度计扫描出对硝基苯酚的最大吸收峰值是在306nm处的，这与文献中的412nm是不相符的，我想知道这是为什么呢？有哪位大侠帮着分析一下原因。。。。
赞一下 回复此楼
水利万物而不争
6楼2012-08-29 20:35:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐雪-

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HarveyWang at 2012-02-17 11:52:06
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导， ...

你好 请问可否加你 扣扣 有些问题想像你请教哈 谢谢 十分感谢
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-09 10:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

447451204

新虫 (初入文坛)
请问最后用那个做的标准曲线，我也遇到了一样的问题。用蒸馏水配制个文献一致，用缓冲溶液就不一样

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2018-05-18 12:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyh0822

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lovezy530520 at 2012-02-17 16:56:10
你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~...

底物PNPP是怎么溶解的啊
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2018-07-14 20:37:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕渴高飞

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zyh0822 at 2018-07-14 20:37:54
底物PNPP是怎么溶解的啊...

请问p-NPP是怎么溶解的啊？？
赞一下 回复此楼
10楼2020-08-13 10:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lovezy530520 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 290求调剂 +3 孔志浩 2026-03-12 8/400 2026-03-15 15:30 by 孔志浩
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 309求调剂 +4 花与叶@ 2026-03-10 4/200 2026-03-14 21:26 by a不易
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 328，0703考生求调剂，一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +4 快乐的香蕉 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:41 by JourneyLucky
[考研] 泣血叩求调剂恩，愿以丹心报师恩 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +9 ADT 2026-03-11 9/450 2026-03-13 21:55 by JourneyLucky
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 资源与环境 285 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:31 by houyaoxu
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 293求调剂，一志愿陕师大生物学 +3 ??????.?.??? 2026-03-09 3/150 2026-03-11 10:02 by 学员8dgXkO
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭