应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题
101/1返回列表
查看: 6471  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lovezy530520

木虫 (正式写手)

[求助] p-NPP法测定脂肪酶活性p-NP标准曲线问题

用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导，是我的方法不对吗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-06 15:11:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们只用tris缓冲液 ，好像。
赞一下 回复此楼
想要走得快，就单独上路；想要走得远，就结伴同行！！
2楼2012-02-16 15:49:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857(金币+1): 鼓励交流 2012-02-18 10:15:03
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导，是我的方法不对吗？




回答：你的方法有严重问题。

1.p-NP该底物的吸收光谱受溶液中的pH影响极大！
碱性时其吸收最大，而且稳定。
你做p-NP的标准曲线时，应该用Na2CO3 溶液（例如0.5 M）的。
而不是用Tris-HCl或其他溶液。

2.你在实际测定时，反应完后，你的反应液应该用Na2CO3 溶液（例如 1M）与反应液同体积混合，一方面是为了产物的稳定，另一方面是终止了反应。
赞一下(4人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
3楼2012-02-17 11:52:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lovezy530520

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HarveyWang at 2012-02-17 11:52:06:
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导 ...

你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~
赞一下 回复此楼
4楼2012-02-17 16:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
4楼: Originally posted by lovezy530520 at 2012-02-17 16:56:10:
你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~

好好看看上面我说的内容！
不想再重复第二遍。
赞一下(1人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2012-02-17 17:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

崛起11

铁虫 (初入文坛)
我在用p-NPP法测脂肪酶活性时，做对硝基苯酚标准曲线时用的是乙腈作溶剂，配制了0.1mol/L的溶液，稀释至1mmol/L，用紫外分光光度计扫描出对硝基苯酚的最大吸收峰值是在306nm处的，这与文献中的412nm是不相符的，我想知道这是为什么呢？有哪位大侠帮着分析一下原因。。。。
赞一下 回复此楼
水利万物而不争
6楼2012-08-29 20:35:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐雪-

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by HarveyWang at 2012-02-17 11:52:06
用该法测酶活标准溶液是不是也应该用tris-HCL缓冲液配制？之前用蒸馏水配制的标准溶液做出的标准曲线也资料相符，此次用缓冲液配制的标准溶液最大浓度（10ug/ML）的吸光度只有0.167（410处），请各位大牛给予指导， ...

你好 请问可否加你 扣扣 有些问题想像你请教哈 谢谢 十分感谢
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-09 10:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

447451204

新虫 (初入文坛)
请问最后用那个做的标准曲线，我也遇到了一样的问题。用蒸馏水配制个文献一致，用缓冲溶液就不一样

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2018-05-18 12:52:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zyh0822

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lovezy530520 at 2012-02-17 16:56:10
你好~这个问题已解决了~是因为P-NP未完全溶解~浓度不对~我看文献上大家在配底物溶液时都用的Tris-HCl缓冲溶液~但不知道标准溶液用什么~...

底物PNPP是怎么溶解的啊
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2018-07-14 20:37:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕渴高飞

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by zyh0822 at 2018-07-14 20:37:54
底物PNPP是怎么溶解的啊...

请问p-NPP是怎么溶解的啊？？
赞一下 回复此楼
10楼2020-08-13 10:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lovezy530520 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 03:31 by xxniao123
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭