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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶活性测定
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puguilin

禁虫 (小有名气)
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1楼2012-01-04 14:36:19
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puguilin

禁虫 (小有名气)
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7楼2012-01-04 23:11:27
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hzlatqh

银虫 (小有名气)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
酶活测定时为什么在测定单位时间反应物减少量或生成物增加量时，还要比上所测体系中蛋白含量！欢迎讨论！
-----
1 为了和别人的体系进行比较。你的体系含有的酶的浓度与其他研究者的一般不相同，这样单位时间单位体积内得到的产物生成量肯定是不一样的。所以要消除其影响。
2 为了表明你的酶的纯度。目标酶在你的酶提取液中浓度越高，则单位蛋白含量的酶活力越高。这个和文献报道的最高值相比，可以大体知道你的酶液的纯度。

3为了表明你的酶的特性。要是同源酶或者同工酶，则可以用比酶活的概念说明你的酶的性质是否比别的同功能的酶要好。

个人见解。。。
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13楼2012-01-05 23:41:29
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普通回帖

wen1023tao

铜虫 (小有名气)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
底物的浓度和酶的多少都会影响反应速度，要准确的测定酶的活性，最好保证其他条件一样，这样才又可比性
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2楼2012-01-04 15:10:58
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walingliu

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
puguilin(金币+1):谢谢参与
看天(金币+2): 鼓励回答 2012-01-05 09:31:43
除以蛋白含量的话应该就是比酶活了吧。酶活力的大小不仅和反应条件有关，也和酶蛋白的含量有关。感觉比酶活比较起来更有意义。不知道该不该这样理解？
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4楼2012-01-04 19:39:28
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imyting

至尊木虫 (正式写手)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
测蛋白含量应该就是为了
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5楼2012-01-04 21:23:56
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imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
看天(金币+2): 鼓励回答 2012-01-05 09:31:59
失误，没写完。测蛋白含量应该就是为了确定酶的浓度吧，这样得到的酶活数据才有可比性，毕竟酶的活性一般都很高，量上差一点可能会对酶活数据有很大的影响。
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6楼2012-01-04 21:25:31
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yxwjimmy

木虫 (正式写手)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
酶的活性，用“**U/mg protein”表示，还是用“**U/mg FW”表示更好一些呢？一直没想明白。
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8楼2012-01-05 09:02:20
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asintec

木虫 (正式写手)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
百度百科：
比活：每毫克酶蛋白所具有的酶活力。单位是u/mg。比活越高则酶越纯。
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9楼2012-01-05 09:03:52
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imyting

至尊木虫 (正式写手)
puguilin(金币+1): 哦，好的谢谢，非常感谢！ 2012-01-05 11:20:53
引用回帖:
7楼: Originally posted by puguilin at 2012-01-04 23:11:27:
我测了一种酶，苯丙氨酸解氨酶，该酶感觉催化活性很慢，文献上报道后，需测定反应1h后之间吸光值的变化，我参考了很多种方法，普遍出现的规律酶反应速率很多，不同处理之间的OD值变化不大，然而不同时间或同一样 ...

楼主，你的试验中不确定的东西太多了，不知道这种酶的研究现状怎么样？如果研究的还很少，酶活处于不确定的状态，那么您的实验还是有参考价值的。如果酶活目前已有比较统一的意见，那么你得注意了，你实验中的所有不确定的东西，比如如何保证酶量是相同的、试验中蛋白量的减少是酶的减少还是其他蛋白的减少等等问题都会成为你投文章时的致命伤。我们一般测酶活都用纯蛋白，关键还得看看文献，确定这种酶当前的研究现状。不客气的说，你的实验设计上是有漏洞的。
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10楼2012-01-05 09:20:22
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liuyu_sdili

木虫 (正式写手)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
我认为如果测酶量的话直接测酶活就可以了，如果你处理方法相同的话是可以比较酶量大小的。至于用酶活力比上蛋白含量（比活力），由于你的杂蛋白含量不确定， 所以没有多大意义，比活力还是应该用纯酶来做~~
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11楼2012-01-05 09:33:14
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puguilin

禁虫 (小有名气)
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12楼2012-01-05 11:19:32
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hzlatqh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by puguilin at 2012-01-04 23:11:27:
我测了一种酶，苯丙氨酸解氨酶，该酶感觉催化活性很慢，文献上报道后，需测定反应1h后之间吸光值的变化，我参考了很多种方法，普遍出现的规律酶反应速率很多，不同处理之间的OD值变化不大，然而不同时间或同一样 ...

这样的话，我觉得需要对你的目标酶进行起码的纯化，才能进行关于“酶”的表征。不然得到的比酶活数据仅仅能反映你提取液的性质，而不是目标酶的性质。
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14楼2012-01-05 23:46:36
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hzlatqh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by puguilin at 2012-01-05 11:19:32:
我这个也一直未弄懂，顶！

FW是啥啊？我基本没见过这个单位。。。求教。。
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15楼2012-01-05 23:47:32
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zxhong

金虫 (正式写手)
★
puguilin(金币+1):谢谢参与
学习了
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16楼2012-01-13 10:48:52
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小姬虫虫

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by hzlatqh at 2012-01-05 23:47:32
FW是啥啊？我基本没见过这个单位。。。求教。。...

fresh weight 鲜重
不是单位，就是鲜重的缩写
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17楼2012-06-29 15:54:41
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clarktao3楼
2012-01-04 15:39  
puguilin(金币+1):谢谢参与
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