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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] P-Npp法测脂肪酶活性

大家好,我最近在用P-NPP法测霉菌胞内的脂肪酶活性我破碎细胞的步骤是:超声功率在200W下,冰水浴超声15分钟,超5秒,停5秒。我的菌是经过离心,倒掉上清液,菌体中加入用PH=7.5的磷酸缓冲液,放在超声波中超声。超15min后4℃下冷冻离心。取上清液,测酶活。我不知道这个方法对不?
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只要努力,总会有结果的
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2012-03-21 20:58:56
amisking: 金币+1, 鼓励帮助解答问题! 2012-03-21 20:58:57
先功率大点超声试下,没有酶活再说。可以用细胞直接反应
或者用蜗牛酶溶菌酶破壁细胞,方法很多,都要做实验去试试
关注我关注的
4楼2012-02-03 21:16:58
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flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
霉菌细胞破碎用超声估计很困难,最好是用液氮研磨!
2楼2012-01-28 14:49:35
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by flightty at 2012-01-28 14:49:35:
霉菌细胞破碎用超声估计很困难,最好是用液氮研磨!

在冰浴下研磨行不
只要努力,总会有结果的
3楼2012-02-02 21:04:22
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zhanglifen

银虫 (初入文坛)

请问楼主P-NPP是在哪里买到的呀?我找了好多家公司都没有,谢谢!
5楼2012-02-28 10:07:51
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