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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » P-Npp法测脂肪酶活性
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)

[求助] P-Npp法测脂肪酶活性

大家好，我最近在用P-NPP法测霉菌胞内的脂肪酶活性我破碎细胞的步骤是：超声功率在200W下，冰水浴超声15分钟，超5秒，停5秒。我的菌是经过离心，倒掉上清液，菌体中加入用PH=7.5的磷酸缓冲液，放在超声波中超声。超15min后4℃下冷冻离心。取上清液，测酶活。我不知道这个方法对不？
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只要努力，总会有结果的
1楼2012-01-14 20:59:24
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 回帖置顶 2012-03-21 20:58:56
amisking: 金币+1, 鼓励帮助解答问题！ 2012-03-21 20:58:57
先功率大点超声试下，没有酶活再说。可以用细胞直接反应
或者用蜗牛酶溶菌酶破壁细胞，方法很多，都要做实验去试试
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关注我关注的
4楼2012-02-03 21:16:58
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flightty

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
霉菌细胞破碎用超声估计很困难，最好是用液氮研磨！
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2楼2012-01-28 14:49:35
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秦川萝卜头

金虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by flightty at 2012-01-28 14:49:35:
霉菌细胞破碎用超声估计很困难，最好是用液氮研磨！

在冰浴下研磨行不
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只要努力，总会有结果的
3楼2012-02-02 21:04:22
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zhanglifen

银虫 (初入文坛)
请问楼主P-NPP是在哪里买到的呀？我找了好多家公司都没有，谢谢！
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5楼2012-02-28 10:07:51
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